论文部分内容阅读
本试验主要研究芪苓散粗多糖对四氯化碳所致雏鸡的急性化学性肝损伤的保护作用和促进修复作用,以探讨芪苓散粗多糖的作用机理。同时探讨N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶与雏鸡急性化学性肝损伤之间的关系。本试验芪苓散粗多糖是采用超声波辅助法提取的工艺流程,并以蒽酮-硫酸法测定芪苓散粗多糖的提取量与提取率。试验得出多糖含量为:39.71%。本试验将96只15d三黄雏鸡随机分成空白组和五个四氯化碳(CCl4)剂量组,50%四氯化碳浓度分别为8、12、14、16、18mL·kg-1,每组16只。空白组不做任何处理,模型组灌胃相应浓度的四氯化碳油溶液,分别于灌胃12h、24h、48h、72h后各剖杀4只雏鸡,采取血液和组织脏器进行病理学检查。通过检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性的改变,并观察肝脏病理组织学变化,以建立雏鸡肝脏损伤的实验动物模型。由试验结果可得出:与其他剂量组比,12mL·kg-1剂量组血清ALT、AST活性升高显著性高于其他组,且在48h达到最高峰。将96只1d健康三黄雏鸡随机分成E、F组,E、F组各随机分为六个小组,分别是空白对照组、四氯化碳攻毒对照组、联苯双酯阳性对照组、芪苓散粗多糖低、中、高剂量组,每组8只雏鸡。空白组与其他各组隔离饲养;攻毒组灌胃12mL·kg-150%四氯化碳油溶液;阳性组灌胃180mg·kg-1联苯双酯溶液;低剂量组灌胃150mg·kg-1芪苓散粗多糖;中剂量组灌胃300mg·kg-1芪苓散粗多糖;高剂量组灌胃600mg·kg-1芪苓散粗多糖。从8d开始,E、F两大组除了空白组、攻毒组,其它各组都灌胃相应药物。E组灌胃2w,F组灌胃4w。在喂药第2w的第1d,第4d和第7d除空白组,其他各组均灌胃50%四氯化碳油溶液造模。E组在最后一次造模后48h后,F组在造模2w后处死。通过测定血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBiL)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase),肝匀浆丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的变化,并观察肝脏组织显微结构的变化,系统地研究芪苓散粗多糖对CCl4引起雏鸡肝损伤的影响,以及NAGase与雏鸡急性肝损伤的关系。试验结果如下:E组试验结果:(1)肝脏指数的比较:与空白组比较,攻毒组肝脏增重最大;低剂量组、中剂量组、高剂量组肝脏指数差异都差异极显著(P<0.01)。与攻毒组比较,各组的肝脏指数都呈差异显著或者极显著地降低(P<0.050.01)。与阳性组比较,低、中、高剂量多糖组的肝脏指数差异不显著(P>0.05)。(2)ALT、AST活性和TBiL含量的变化的比较,CCl4致雏鸡血清ALT、AST活性和TBiL含量的变化与空白组比较,攻毒组升高极显著明显(P<0.01)。与攻毒组比较,低、中、高剂量多糖组和阳性组均可极显著降低CCl4肝损伤血清ALT、AST和TBiL水平(P<0.01)。(3)MDA和GSH活性变化的比较,CCl4致雏鸡MDA含量的变化与空白组比较,攻毒组升高极显著明显(P<0.01)。与攻毒组比较,低、中、高剂量多糖组和阳性组均可极显著降低CCl4肝损伤MDA含量(P<0.01),且随着多糖剂量的增加效果更明显;GSH活性与空白组比较,攻毒组降低明显,差异极显著(P<0.01)。与攻毒组比较,各个多糖组都有不同程度的升高。(4)血清NAGase的活性变化的比较,与空白组比较,攻毒组、阳性组、多糖组血清NAGase的活性均呈上升趋势(P<0.050.01),说明CCl4能够致雏鸡肝损伤且引起血清NAGase活性升高。阳性组、芪苓散粗多糖低、中和高剂量组血清NAGase活性均极显著低于攻毒组(P<0.01),表明了芪苓散粗多糖能够抑制CCl4导致的血清NAGase活性异常升高。(5)肝组织切片的观察,灌胃CCl4后,肝组织可见明显的脂肪变性、水泡变性和肝细胞坏死,试验发现芪苓散粗多糖低、中、高剂量组的肝损伤程度低于攻毒组,F组试验结果:(1)肝脏指数的比较,与空白组比较,肝脏指数只有攻毒组差异显著(P<0.05)。与攻毒组比较,各组都有显著或者极显著地降低,低、中、高剂量多糖组与攻毒组比较肝脏指数差异极显著降低(P<0.01)。与阳性组比较,低、中、高剂量多糖组中肝脏指数差异不显著(P>0.05)。(2)ALT、AST活性和TBiL含量的变化的比较,CCl4致雏鸡血清ALT、AST活性和TBiL含量的变化与空白组比较,多糖各组和阳性组肝损伤均有所减轻,且随着剂量增大,效果越明显。(3)MDA和GSH活性变化的比较,CCl4致雏鸡MDA含量的变化与空白组比较,攻毒组升高显著明显(P<0.05)。与攻毒组比较,各个多糖组和阳性组均基本回到正常水平;GSH活性与空白组比较差异显著(P<0.05)。与攻毒组比较,各个多糖组都有不同程度的增高,高剂量组差异极显著(P<0.01)。(4)血清NAGase的活性变化的比较,结果发现与空白组比较,除攻毒组外,其余各组均有恢复趋势,与空白组差异不显著(P>0.05),说明芪苓散粗多糖对CCl4引起的肝损伤有保护和促进修复作用。芪苓散粗多糖低、中、高剂量组和阳性组血清NAGase活性均极显著低于攻毒组(P<0.01)。(5)肝组织切片的观察,灌胃4w后可见肝组织空泡变性和脂肪变性明显减少甚至消失,仅有少量的坏死,且多糖组肝细胞出现双核细胞。