抗感染NZF方的研究

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目前,临床上由细菌引起的感染性疾病的发病率呈逐年上升的趋势。人类和养殖业中抗生素滥用问题日益严重,由此引发的耐药性和动物源性食品的药物残留等问题,引起愈来愈多人的担心。医药界迫切希望能找到新的抗感染药物,而具有资源丰富、副作用小且不易产生耐药性等优特点的中草药是目前研究的热点。本课题在前期研究的基础上,以中医药理论为指导,通过单味中药和中药复方在体外对人类和养殖业中常见致病菌的抗菌作用研究,筛选出抗菌活性最强的复方作为NZF方。以体外抗菌活性为评价指标,研究NZF方的提取纯化工艺,以期得到抗感染作用强的中药复方及其活性部位,为抗感染新药研发提供实验基础,也为其在养殖业中的应用提供依据。现将研究结果分述如下:(1)NZF方的组方研究:中药体外抗菌作用研究采用纸片法和微量稀释法,以金黄色葡萄球菌、福氏痢疾志贺氏菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、鼠伤寒杆菌、肠炎沙门氏菌、白色念珠菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌为受试菌株,通过测定不同溶剂提取的NZ、HZ、BZ、SL等单味中药及其组成的中药复方的抑菌环直径、最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)等体外抗菌评价指标,筛选出最佳中药复方(NZF方),并对NZF方的最佳配伍比例进行研究。(2)NZF方的最佳提取工艺研究:以测定NZF方中指标成分W的含量和体外抗菌活性为评价指标,对NZF方的提取工艺进行研究。通过对NZF方提取工艺的单因素考察(提取方法、溶媒浓度、提取时间、提取次数以及料液比),发现不同提取方法和不同提取时间中以M2法、提取1h,复方中指标成分W的含量最高,且抑菌效果好;不同溶媒浓度、料液比以及提取次数提取的NZF方中指标成分W的含量各有差别,且体外抑菌效果也不同。根据单因素实验结果,选取不同溶媒浓度、料液比和提取次数设计正交实验做进一步优化,得到NZF方的最佳提取工艺为:g%的溶剂Y为溶媒,料液比1:10,M2法提取两次,每次一小时。(3)NZF方不同极性部位的体外抑菌研究:分别用溶剂S、溶剂E、溶剂X和溶剂Z处理纯化NZF方提取物,将得到的不同纯化部位分别进行体外抑菌试验,结果显示部位X的抑菌效果最好。体外抑菌实验结果表明,NZF方对多种细菌具有很好的抑菌效果,特别是对金黄色葡萄球菌、溶藻弧菌以及副溶血弧菌的抑制作用最强,其抗菌有效成分主要集中于部位X中。研究表明,NZF方可作为感染性疾病的药物进一步研究。
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