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[目的]前期课题组通过基因芯片检测筛选出EBV诱发淋巴瘤的3个候选关键分子,分别是TOP2A、PBK、HIST2H2BE基因。本课题采用荧光定量PCR和Western blot技术检测体外EBV转化淋巴母细胞和正常人淋巴细胞中TOP2A、PBK、HIST2H2BE差异表达情况,验证前期课题组基因芯片结果,为EB病毒诱导淋巴细胞转化和淋巴瘤发生的分子机制提供实验依据。[方法]采集7例健康献血员外周静脉血并从中分离出正常人淋巴细胞,用EBV体外诱导淋巴细胞转化,构建转化的淋巴母细胞模型。提取EBV转化淋巴母细胞及配对的正常人淋巴细胞的总RNA及蛋白,应用Western blot和荧光定量PCR方法,检测TOP2A、PBK、HIST2H2BE基因在7例EBV体外转化的淋巴母细胞及配对的健康成人正常淋巴细胞中的表达。[结果]本实验成功建立了7例EBV转化淋巴母细胞样细胞系,并检测了TOP2A、PBK、HIST2H2BE基因在7例EBV转化淋巴母细胞及配对的正常人淋巴细胞中的表达情况。TOP2A基因在正常人淋巴细胞及转化淋巴母细胞中均有表达,转化细胞TOP2A的mRNA与正常人淋巴细胞相比,表达上调1.413倍,差异具有统计学意义(P<0.001);Western blot结果显示,TOP2A在转化细胞中的蛋白与正常人淋巴细胞相比,表达上调2.760倍,差异具有统计学意义(P<0.001)。PBK基因在正常人淋巴细胞及转化淋巴母细胞中均有表达,转化细胞中PBK的mRNA与正常人淋巴细胞相比,表达上调1.422倍,差异具有统计学意义(P<0.001);Western blot结果显示,PBK在转化细胞中的蛋白与正常人淋巴细胞相比,表达上调3.047倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。HIST2H2BE基因在正常人淋巴细胞及转化淋巴母细胞中均有表达,转化细胞中HIST2H2BE的mRNA与正常人淋巴细胞相比,表达上调1.757倍,差异具有统计学意义(P<0.001);Western blot结果显示,HIST2H2BE在转化细胞中的蛋白与正常人淋巴细胞相比,表达上调2.003倍,差异具有统计学意义(P<0.001)。[结论]TOP2A、PBK、HIST2H2BE基因在EBV转化淋巴母细胞中mRNA转录和蛋白表达均高于正常人淋巴细胞。