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轮叶百合(Lilium distichum)和垂花百合(Lilium cernuum Komar.)原产于中国东北地区,是珍贵的二倍体野生百合资源。其花色独特、耐阴抗寒,但花朵娇小,植株易染病。多倍体具有器官巨大、植株健壮、抗逆性强等特点,而常规多倍体育种方法通常会导致大量嵌合体产生。体细胞胚起源于单细胞,遗传稳定性好,繁殖效率高并可避免嵌合体形成,是多倍体育种的良好材料。本试验首次以轮叶百合和垂花百合鳞片和体细胞胚为外植体材料,利用不同浓度秋水仙素进行多倍体诱导,比较不同诱导时间和处理方式对多倍体诱变率的影响,并综合使用形态学观测、根尖染色体计数、气孔观测等方法对加倍植株进行倍性鉴定,以期为提升两种野生百合观赏价值、创制百合新种质、提高繁殖系数奠定基础。主要研究结果如下:1.以两种野生百合无菌苗鳞片为受体,以MS+PIC 1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1诱导体细胞胚,诱导率分别为89.8%和91.2%。组织学鉴定结果表明:两种野生百合体细胞胚发生途径不同,其中轮叶百合为间接发生途径,而垂花百合体细胞胚发生为直接发生途径。从两种百合体细胞胚起源方式来看,均包括外起源和内起源两种方式,且以外起源方式为主。轮叶百合在体胚诱导第15 d首先出现外起源,在第21 d出现内起源;而垂花百合在体胚诱导第9 d首先出现内起源,第15 d出现外起源。2.利用不同浓度秋水仙素(0.01%,0.05%,0.1%)作为诱变剂,采用浸泡法和混培法对两种百合鳞片和体细胞胚进行人工多倍体诱导。当秋水仙素浓度从0.01%-0.1%时,以两种受体诱导的植株成活率均有下降,且在浸泡法中当秋水仙素浓度为0.1%处理72 h时,混培法中秋水仙素浓度达到0.1%处理20 d时两种百合致死率均为100%。根据诱导效果,混培法培养时间长,毒害作用大,诱导过程中的致死率较高;而浸泡法致死率相对较低,增加了多倍体的诱导机率,是诱导百合多倍体的最佳途径。3.利用根尖染色体计数法进行倍性鉴定,两种百合二倍体染色体条数均为24条,四倍体染色体条数为48条,在诱导过程中没有发现嵌合体形成。并且以鳞片和体细胞胚为受体均可诱发多倍体产生,但以体细胞胚为受体效果较好,尤其是在轮叶百合中以0.05%秋水仙素中浸泡48 h以及垂花百合中以0.05%秋水仙素中浸泡24 h中四倍体植株诱变率最高,分别为28.57%和23.08%。4.对获得的两种百合不同倍性植株进行形态学和细胞学鉴定。结果表明:在相同条件下,四倍体植株表现为小鳞茎增大,叶片宽厚。非整倍体植株部分出现叶面褶皱,形态畸形化、矮化。并且多倍体植株的气孔和保卫细胞明显增大,轮叶百合四倍体气孔约为二倍体的1.63倍,垂花百合四倍体气孔约为二倍体气孔的2倍。两种百合移栽最佳基质为草炭:蛭石:河沙=1:1:1,四倍体植株较二倍体植株外观差异显著且植株更健壮。