论文部分内容阅读
迷迭香酸是天然的抗氧化剂,实验用富含迷迭香酸的药用植物为原料,以迷迭香酸含量为检测指标,建立高效液相检测迷迭香酸的色谱条件;运用超声波细胞破碎辅助提取技术,通过响应面设计对夏枯草中的迷迭香酸和异迷迭香酸苷进行工艺优化;采用双水相萃取技术对迷迭香酸和异迷迭香酸苷进行富集纯化。研究内容如下:1.建立迷迭香酸含量的高效液相检测方法,其色谱条件为:检测波长325 nm;柱温25℃;流速为1 mL/min;进样量10μL;流动相体系为0.1%三氟乙酸-甲醇(60:40,v/v),等度洗脱30 min。在该条件下迷迭香酸峰型良好。2.采用超声波辅助提取技术(UAE)对多种药用植物中迷迭香酸进行提取并测定含量,运用响应面实验设计优化提取工艺,得到不同药用植物中迷迭香酸的最佳提取工艺,其最佳条件分别为:泽兰(ALL):液料比20 mL/g,超声功率250 W,超声时间30 min;丹参(RRSM):液料比20 mL/g,超声功率250 W,超声时间40 min;夏枯草(FPV):液料比20 mL/g,超声功率250 W,超声时间50 min;紫苏叶(LPF):液料比25 mL/g,超声功率250 W,超声时间50 min;紫苏籽(FPF):液料比25 mL/g,超声功率250 W,超声时间40 min。乙醇体积分数均为50%,温度为20℃。在最佳条件下,迷迭香酸的得率分别为:7.78±0.06 mg/g;1.87±0.04 mg/g;5.79±0.08 mg/g;1.71±0.03 mg/g;2.68±0.57 mg/g。3.用超声波细胞破碎辅助提取技术(UCGE)提取夏枯草中的迷迭香酸和异迷迭香酸苷,通过动力学实验与响应面实验考察不同因素对目标产物得率的影响,得到同时提取夏枯草中迷迭香酸和异迷迭香酸苷的最佳提取工艺:乙醇体积分数50%,液料比25 mL/g,空化时间1.5 s,缓冲时间2.0 s,超声功率310 W,提取时间6 min。在最佳条件下迷迭香酸和异迷迭香酸苷的得率分别为.:5.66±0.01 mg/g、0.71±0.06 mg/g。4.采用双水相萃取技术(ATPE)技术对夏枯草中迷迭香酸与异迷迭香酸苷的纯化工艺参数进行了研究。通过对比四种双水相体系(PEG/硫酸铵、PEG/柠檬酸钠、乙醇/硫酸铵和乙醇/柠檬酸钠)对目标产物的萃取能力,选择PEG/柠檬酸钠作为双水相体系萃取目标产物。通过对成相物的质量分数、温度、中性盐等因素的考察,确定了双水相萃取的最佳工艺参数:PEG600质量分数为20%,柠檬酸钠质量分数为22%,萃取温度40℃,外加中性盐NaCl的质量分数为2%,采用匀浆辅助萃取15 min。在该最佳萃取工艺下,得到迷迭香酸和异迷迭香酸苷的萃取率分别为:92.3%±0.03%、90.7%±0.02%,通过双水相萃取,迷迭香酸与异迷迭香酸苷的纯度提高了2倍以上。本研究通过对富含迷迭香酸药用植物进行筛选,建立了高效液相检测迷迭香酸的色谱条件;将超声探头直接接触植物组织与提取溶剂,优化了夏枯草中迷迭香酸与异迷迭香酸苷的提取工艺,采用双水相萃取技术对目标成分进行富集纯化。此方法绿色环保,成本较低,为迷迭香酸的高效提取分离奠定了理论基础。