矮牵牛（Petunia hybrida）是世界上著名的花坛花卉,同时也是分子生物学研究的理想模式植物。课题组前期在矮牵牛中获得一个与雄蕊育性有关的b HLH转录因子家族成员PhMYC2。已有研究表明MYC2为茉莉酸信号途径的关键转录因子,JAZ蛋白为其上游调控因子,二者之间有互作,且JAZ蛋白在JA介导的雄蕊发育中发挥了重要作用,其异常表达可以导致雄性不育。拟南芥中的JAZ家族蛋白已经研究得非常透彻,但是,我们对矮牵牛中JAZ家族蛋白的功能及互作调控网络还尚不清楚。为了解析矮牵牛中JAZ家族蛋白的基本特征及功能,我们对矮牵牛JAZ家族蛋白进行系统的研究,研究结果如下:1、我们从矮牵牛基因组中鉴定到12个JAZ家族基因,并成功地克隆出了所有成员,然后对这些PhJAZ基因进行了生物信息学分析。多序列比对的结果表明每个PhJAZ蛋白成员都含有保守的TIFY和Jas结构域。选取双子叶植物拟南芥、番茄、矮牵牛以及单子叶植物水稻中的JAZ家族蛋白构建系统发育树,发现四个物种的所有成员可以分为6个组,分别是JAZⅠ、JAZⅡ、JAZⅢ、JAZⅣ、JAZⅤ、JAZⅥ,矮牵牛JAZ家族跟番茄有着更近的亲缘关系。对PhJAZ家族基因启动子区顺式作用元件进行分析,发现每个基因含有的顺式作用元件种类多样,主要包含:激素响应元件,光响应元件以及胁迫响应元件。2、通过酵母双杂交试验来验证矮牵牛JAZ家族蛋白与转录因子PhMYC2之间的相互作用,结果显示,除PhJAZ8、10、11外,PhJAZ1、2、3、4、5、6、7、9、12能够与PhMYC2蛋白相互作用,推测它们之间可能通过相互作用形成复合体,从而抑制转录因子MYC2的转录活性,进而控制下游关键基因的表达。3、对PhJAZ5、PhJAZ9、PhJAZ12蛋白进行亚细胞定位分析,成功构建3个融合YFP的超表达载体并瞬时转化到本氏烟草中,在激光共聚焦显微镜下观察,结果表明这3个蛋白均定位在细胞核上。4、我们对矮牵牛植株分别进行了外源MeJA、弱光、短日照及低温的胁迫处理,利用q RT-PCR分析PhJAZ5、PhJAZ9、PhJAZ12及PhMYC2的表达模式,结果如下:（1）MeJA胁迫后PhJAZ、PhMYC2基因的表达量均明显上调,但是,PhMYC2表达量的变化程度远没有PhJAZ9及PhJAZ12大,而PhJAZ9和PhJAZ12蛋白均能与PhMYC2互作,因此推测PhMYC2的表达可能受到了PhJAZ9和PhJAZ12基因的抑制。（2）弱光胁迫下,除PhJAZ9外,各个基因在花药及花芽中总体上调表达。PhJAZ9的表达在花芽发育2.5b和3.5b时期受到抑制,而PhMYC2的表达量在这两个时期显著升高。（3）短日照胁迫下,PhJAZ基因的表达量变化趋势与弱光照处理有一定的相似性。其中,PhJAZ9主要在花药和花芽的后期（1.5a-3.5a）表达,而PhMYC2的表达量的变化趋势与其大致相反,主要在花药和花芽的前期（0.2a-1.0a）表达。（4）在低温胁迫下PhJAZ基因在花药各时期的表达总体上调,但PhMYC2的表达却受到抑制。这符合它们一个为转录抑制因子,另一个为转录激活因子的身份,互相制约对方的表达,其相反的变化趋势暗示了它们功能上的差异性。