1研究背景
　　 随着交通运输业的发展,骨折成为临床上的常见病和多发病之一。
　　 目前,中医骨折三期治则已成为现代中医药治疗骨折的指导原则[1.2],然而对于骨折三期治则的分子生物学机制研究则很少。
　　 为进一步揭示中医骨折三期治则的分子生物学机制,应用原位杂交技术检测骨折愈合过程中FG-2mRNA,TG-β1mRNA基因转录水平。研究其分布及表达规律及时间相,从现代医学的角度揭示中医骨折三期治则的科学性,指导骨折的临床治疗,推动中医骨科治疗的快速发展。
　　 2材料与方法
　　 2.1实验动物与骨折模型
　　 选用新西兰家兔,健康,雄性,体重2±0.5 kg;在桡骨中下段1/3处,造成3mm完全横断骨折。
　　 2.2随机分组
　　 将140只家兔随机分为四组,每组35只,分别为三期组(中药三期治疗组)、一期组(中药一期治疗组)、模型组(模型对照组)和阳性药组(阳性药物对照组)。三期组、一期组与阳性药组三组文中统称中药组。每个小组再随机分为7个小组,每组5只。
　　 2.3干预方法
　　 将中药制成含生药5g·ml-1的浓缩口服液,灭菌后装瓶冷藏备用。分早晚2次,灌胃。根据量效反应确定实验最佳用药剂量为2倍等效剂量。根据骨折愈合分期方法与家兔骨折局部组织学变化,将家兔骨折愈合过程分为三期:早期即术后1-7天；中期即术后8-28天；后期即术后29-56天。
　　 三期组根据“中医骨折三期治疗”原则,分三期治疗:早期活血化瘀、行气止痛,选用加减肢伤一方；中期接骨续筋、舒筋活络,选用加减肢伤二方；后期补益肝肾、强筋壮骨,选用加减肢伤三方。一期组将骨折的早期、中期与后期合并为一期,活血化瘀、行气止痛、接骨续筋、补益肝肾、强筋壮骨,选用肢伤一方、二方与三方加减方。阳性药组全程给骨折挫伤胶囊水溶液。模型组给予和实验组等量的蒸馏水灌胃,每日2次。
　　 2.4标本处理
　　 术后第3、6、9、14、28、42、56天每组随机抽取一小组家兔用空气栓塞法处死,取左侧桡骨标本为观察对象,将标本固定、脱钙。
　　 2.5原位杂交
　　 检测骨折标本FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA。
　　 2.6图像及数据分析
　　 对骨折端骨干细胞、骨小梁、内骨膜、外骨膜、纤维骨痂组织各取两个高倍镜视野,对阳性表达细胞进行MOD值测定。用SPSS13.0统计分析软件进行统计分析。
　　 3结论
　　 (1)中药能促进骨折愈合过程中不同组织FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表达,说明中药干预有促进骨折愈合的作用。
　　 (2)骨折三期治疗在不同组织表达都有促进FGF-2mRNA,TGF-β1mRSA表达作用。这是骨折三期治疗促进骨折愈合的作用机制之一。
　　 (3)中药对骨折愈合不同阶段各种组织的FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表达有不同的作用,根据骨折愈合不同阶段施以相应治则的分期治疗较不分期治疗对于FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表达的促进作用更明显,显示中医骨折分期治疗是必要的。
　　 (4)中医骨折三期治则分别针对骨折愈合不同时期的病理变化,采用相应的中药可以促进相应部位的FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表达,是比较科学的骨折分期治疗方法。
　　 5创新点
　　 (1)发现骨折愈合过程中不同组织中FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表达特征
　　 目前对于骨折愈合过程中FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表达的研究,均是研究骨痂中FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA的定量变化。揭示不同组织FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表达特征的研究,末见报道。
　　 (2)阐明骨折三期治疗对骨折愈合过程中FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表达的作用
　　 目前仅对VEGFmRNA和BMP-2mRNA在骨折愈合过程中有过研究,通过研究骨折愈合过程中FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表达变化情况,揭示骨折三期治则促进骨折愈合的作用机制,未见报道。