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目的:支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）是早产儿最具破坏性的并发症之一,其病因和发病机制复杂,病理改变以肺泡和肺微血管发育障碍为主要特征。近年来的研究表明,线粒体功能在BPD的发生发展中起着至关重要的作用。以线粒体生物发生为治疗靶点有望成为改善BPD的潜在策略。SIRT1/PGC-1α及其下游因子核呼吸因子1（nuclear respiratory factor 1,Nrf1）、核呼吸因子2（nuclear respiratory factor 2,Nrf2）及线粒体转录因子A（mitochondrial transcription factor A,TFAM）是控制线粒体生物发生最关键的信号通路之一。沉默信息调节因子2相关酶1（silencing information regulator 2 related enzyme 1,SIRT1）是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+）的去乙酰化酶,它通过去乙酰化激活过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α（peroxisome proliferator-activated receptorγco-activator 1α,PGC-1α）。PGC-1α被看作是调节线粒体生物发生的中心因子。白藜芦醇（resveratrol,Res）存在于多种植物的根、茎、叶、果实中,它是第一个被发现的SIRT1天然激动剂。本课题组先前的研究表明,Res通过激活SIRT1/PGC-1α信号通路减轻了高氧诱导的肺泡上皮细胞凋亡和线粒体功能障碍。本研究旨在建立BPD动物模型,进一步探讨Res是否通过激活SIRT1/PGC-1α介导的线粒体生物发生来减轻新生Sprague-Dawley大鼠高氧性肺损伤。方法:参照本课题组之前的建模方法建立新生Sprague-Dawley大鼠高氧肺损伤模型。将足月自然分娩的新生Sprague-Dawley大鼠在产后（postnatal days,PD）12h内采用excel软件随机分为如下6组:常氧（21%氧气）+生理盐水组（normoxia+normal saline,NN）、常氧+二甲基亚砜组（normoxia+dimethyl sulfoxide,ND）、常氧+白藜芦醇组（normoxia+resveratrol,NR）、高氧（80%-85%氧气）+生理盐水组（hyperoxia+normal saline,HN）、高氧+二甲基亚砜组（hyperoxia+dimethyl sulfoxide,HD）和高氧+白藜芦醇组（hyperoxia+resveratrol,HR）。将HN、HD和HR组置于大小为60cm×44cm×37cm的自制密闭氧箱中,以1-2L/min的流速通入医用氧气,维持箱内80%-85%的氧浓度,用钠石灰吸收过量的二氧化碳。将NN、ND和NR组置于同一室内的空气中。每日定时交换常氧和高氧笼中的母鼠,以避免母鼠氧气中毒,并减少母鼠喂养能力差异带来的影响。每日开箱30-60min,进行新生大鼠给药、笼子清洁、加水加食,并记录新生大鼠的精神状态、反应、进食状态、生长情况和体重等。NR组和HR组从产后第1天到产后第14天每天腹腔注射Res 60mg/kg。ND组和HD组从产后第1天到产后第14天每天腹腔注射35%二甲基亚砜。NN组和HN组从产后第1天到产后第14天每天腹腔注射0.9%生理盐水。35%二甲基亚砜和0.9%生理盐水的注射剂量按照Res的给药剂量计算,注射时间与Res一致。分别于产后第1、7、14天从每组随机抽取10只新生大鼠处死,取肺组织标本。采用苏木精伊红染色技术评估肺组织病理改变;双重免疫荧光染色技术评估线粒体数量及TFAM在线粒体的表达;逆转录定量聚合酶链反应技术检测新生大鼠肺组织中SIRT1,PGC-1α,Nrf1,Nrf2,TFAM,线粒体编码的NADH脱氢酶1（mitochondria-encoded NADH dehydrogenase 1,ND1）,ND4的m RNA水平;Western blot技术检测新生大鼠肺组织中SIRT1,PGC-1α,Nrf1,Nrf2,TFAM蛋白水平。通过以上方法来评价Res是否通过激活SIRT1/PGC-1α信号通路促进线粒体生物发生从而减轻新生大鼠高氧性肺损伤。结果:（1）新生大鼠一般情况和体重变化:在产后第14天,肉眼观察到HN、HD和HR组新生大鼠出现无活力、反应差、消瘦、毛发无光泽、头部震颤、步态不稳和觅奶能力下降等症状,相反,NN、ND和NR组则没有出现上述症状。在产后第7天和第14天,HN、HD和HR组的体重均明显低于NN、ND和NR组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。（2）新生大鼠肺组织病理改变:在产后第7天和第14天,与NN、ND和NR组相比,HN和HD组新生大鼠肺泡发育障碍,而与HN和HD组相比,HR组肺泡损伤有所改善。在产后第14天,与NN、ND和NR组相比,HN和HD组新生大鼠的肺泡化评价指标平均线性截距（mean linear intercept,MLI）及辐射状肺泡计数（radial alveolar count,RAC）分别显著增加和降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而与HN和HD组相比,HR组的MLI和RAC分别显著降低和增加,差异具有统计学意义（P＜0.05）。（3）新生大鼠肺组织免疫荧光改变:在产后第7天和第14天,与NN、ND和NR组相比,HN和HD组新生大鼠肺组织中柠檬酸合酶的平均荧光强度明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而与HN和HD组相比,HR组新生大鼠肺组织中柠檬酸合酶的平均荧光强度明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。在产后第14天,与NN、ND和NR组相比,HN和HD组新生大鼠肺组织中TFAM和柠檬酸合酶的共定位系数明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而与HN和HD组相比,HR组新生大鼠肺组织中TFAM和柠檬酸合酶的共定位系数明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。（4）实时荧光定量PCR结果:在产后第14天,与NN、ND和NR组相比,HN和HD组新生大鼠肺组织中SIRT1、Nrf1、Nrf2和TFAM的m RNA相对表达水平明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而与HN和HD组相比,HR组新生大鼠肺组织中SIRT1、PGC-1α、Nrf1、Nrf2和TFAM的m RNA相对表达水平明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。在产后第7天,与NN、ND和NR组相比,HN和HD组新生大鼠肺组织中ND1的m RNA相对表达水平明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而与HN和HD组相比,HR组新生大鼠肺组织中ND1的m RNA相对表达水平明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。在产后第14天,与NN、ND和NR组相比,HN和HD组新生大鼠肺组织中ND4/ND1的比值明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而与HN和HD组相比,HR组新生大鼠肺组织中ND4/ND1的比值明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。（5）Western blot结果显示:在产后第14天,与NN、ND和NR组相比,HN和HD组新生大鼠肺组织中SIRT1、PGC-1α、Nrf1、Nrf2和TFAM蛋白的相对表达水平明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而与HN和HD组相比,HR组新生大鼠肺组织中SIRT1、PGC-1α、Nrf1、Nrf2和TFAM蛋白的相对表达水平明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:白藜芦醇促进线粒体生物发生减轻了新生大鼠高氧性肺损伤。白藜芦醇激活SIRT1/PGC-1α信号通路来促进线粒体生物发生。