随着北方蔬菜大棚面积扩大,大棚中的根结线虫病害大肆流行,严重影响大棚蔬菜的产量。目前,菜农采用的防治方法是在定植前用化学农药对土壤进行处理或者在蔬菜生长季节连续使用化学农药进行灌根。这样的方法不仅会造成土壤的严重污染,并且化学农药的有毒物质可被蔬菜直接吸收,形成有毒蔬菜,威胁人们的食品安全和健康。因此,非常需要开发无公害的生物防治方法。本硕士论文利用两种昆虫病原真菌：球孢白僵菌TST05菌株的菌粉和金龟子绿僵菌TSL06菌株的发酵液对蔬菜大棚根结线虫进行了防治研究,主要内容有：(1)绿僵菌发酵液对根结线虫防治研究,包括致死率实验、室内盆栽实验、大棚实验、真菌在大棚土壤中的宿存能力,及绿僵菌发酵液毒素成分气相色谱-质谱联用测定。(2)白僵菌菌粉在大棚中对根结线虫的防治研究,包括冬季在西芹上的防治实验、春夏季在黄瓜上的防治实验,及白僵菌在大棚土壤中的宿存能力。研究结果如下：一、绿僵菌发酵液对大棚根结线虫的防治研究结果1)绿僵菌发酵液对根结线虫致死率实验结果用从实验大棚内采集的新鲜的活线虫作为实验材料,实验分三个处理,绿僵菌发酵液的滤液处理组,SDAY培养基处理组,蒸馏水处理组,处理24h后,发酵滤液处理组死亡率为100%,培养基处理组组死亡率为7.40%,蒸馏水处理组死亡率为0。2)绿僵菌发酵液对根结线虫防治效果的盆钵实验结果利用病土在实验室用花盆栽种西芹,分三个处理,绿僵菌发酵液原液处理组、发酵液滤液处理组、蒸馏水处理组,试验它们对根结线虫的防治效果。西芹生长三个月后,结果显示：西芹的平均株高,原液处理组比滤液组高3.1cm,比空白组高6.3cm；西芹单株平均鲜重,原液处理组比滤液组重13.4g,比空白组重6.58g;根瘤数,原液处理组比空白组减少了100%,滤液组比空白组减少了83.88%。结论：绿僵菌发酵液对根结线虫具有明显的防治效果,原液组比滤液组更好。3)绿僵菌发酵液对根结线虫防治效果的大棚实验结果将绿僵菌TSL06菌株用发酵罐制备成发酵液。在大棚内,蔬菜为黄瓜,二月底栽种,实验分三个处理,发酵液处理组,农药处理组,空白处理组,五个月后,统计黄瓜根上的根瘤数。根瘤按直径大小分为四组,分别是直径为0-3mm、4-6mm、7-9mm、≥10mm.结果显示：施菌组平均根瘤数按直径从小到大分别为56、35、33、4个／株,农药组分别为45、9、8、1个／株,空白组分别为67、54、39、11个／株。结论：施菌组与空白相比,有良好的防治效果,但是,稍微差于农药组。4)绿僵菌发酵液代谢毒素成分分析结果结果用正己烷和乙酸乙酯作为溶剂,对发酵液进行提取,提取物经气相色谱-质普联用仪分析。结果：得到20种可能有毒性的小分子有机物,如2,5-二叔丁基苯酚、邻苯二甲酸-异丁基-2-戊基酯、1-亚乙基-1H-茚、2,4二叔丁基苯酚、2,4-二叔丁基-7,7-二甲基-1,3,5-环庚三烯等。二、白僵菌菌粉对大棚根结线虫的防治研究结果1)第一季(冬季)的西芹实验结果将白僵菌TST05菌株制成菌粉。在大棚内,蔬菜为西芹,十月初栽种,栽种前将菌粉施予土壤中,实验分三个处理,施菌组,农药组,空白组,三个月后测量西芹的株高、根长、鲜重、根瘤数、叶片的叶绿素含量及其净光合速率。大棚-1的结果显示：芹菜平均株高,施菌组比施用农药组高10.42cm,比空白组高10.00cm；芹菜单株平均鲜重,施菌组比施用农药组重48g,比空白组重93g；根瘤数,施菌组比空白组减少了54.9%,农药组比空白组减少了50.0%；叶绿素总量,施菌组比施用农药组高0.05mg/g,比空白组高0.277mg／g；净光合速率,施菌组比施用农药组高0.4mg CO2/克鲜重*小时,比空白组高0.367mg CO2/克鲜重*小时。大棚-2的结果显示：芹菜平均株高,施菌组比施用农药组高2.8cm,比空白组高12.7cm；平均鲜重,施菌组比施用农药组轻41g,比空白组重51g;根瘤数,施菌组比空白组减少了45.6%,施用农药组比空白组减少了41.7%；叶绿素总量,施菌组比施用农药组高0.036mg／g,施菌组比空白组高0.133mg／g；净光合速率,施菌组比施用农药组高1.675mg CO2/克鲜重*小时,比空白组高1.725mg CO2/克鲜重*小时。以上结果均证明了白僵菌对根结线虫有良好的防治效果,甚至有优于农药的趋势。2)第二季(春季到夏季)的黄瓜实验结果将白僵菌TST05菌株制成菌粉。在大棚内,蔬菜为黄瓜,二月底栽种,栽种前将菌粉施予土壤中,实验分三个处理,白僵菌处理组,农药处理组,空白处理组,五个月后统计黄瓜根上的根瘤数。根瘤按直径大小分为四组,分别是直径为0-3mm、 4-6mm、7-9mm、≥10mm。结果显示：施菌组平均根瘤数按直径从小到大分别为63、30、22、5个／株,农药组分别为45、9、8、1个／株,空白组分别为67、54、39、11个/株。结论：白僵菌在春季到夏季期间,对根结线虫的防治具有明显效果。但是,效果稍差于农药组。三、两种菌在大棚土壤中的宿存能力实验结果实验制备的绿僵菌发酵液孢子浓度为1×108孢子/mL,白僵菌菌粉孢子含量为1×108孢子/g,施予大棚后,冬季每半月取施菌土样一次,春夏季每一个月取土样一次,测量土壤中的孢子含量。结果显示：冬季,白僵菌在土壤中的浓度依次为2.44×105、3.78x105、3.56x105、3.44×105、1.44×105、1.43×105孢子／g土壤。春夏季,绿僵菌在土壤中的浓度依次为5.00×105、4.22×105、7.11×105、1.44×105、0.11×105孢子/g土壤,白僵菌在土壤中的浓度依次为1.56×105、10.67×105、7.12×105、2.00×105、1.11×105、0.78×105孢子／g土壤。结论：白僵菌和绿僵菌在大棚土壤中有较强的存活能力,持效期均长达3个月。