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研究背景:慢性心力衰竭（chronic heart failure,CHF）是心血管疾病的终末期,其发病率高,预后差,易发生恶性心律失常且猝死率高,是本世纪心血管疾病领域的挑战之一。心室重构是心力衰竭的重要病理过程,心室重构过程中存在心肌细胞凋亡,心肌细胞为不可再生细胞,当心肌细胞减少到一定程度时,胶原支架断裂,心肌室壁变薄,伴随局部运动不协调,心功能逐渐减退,发展为失代偿,直至发生心力衰竭。目前研究证实活性氧（ROS）的堆积会产生细胞毒性,诱导心肌细胞凋亡。H2O2是体内氧化还原代谢的中间产物,同时又是一种ROS,其可以自由的穿越细胞膜,在细胞内产生各种氧化还原反应。例如OH-等活性很强的自由基即是H2O2与细胞内铁离子反应所生成,可以导致心肌细胞凋亡。因此,开展ROS与心肌细胞凋亡之间的研究,阐明ROS诱导心肌细胞凋亡通路以及相关凋亡因子表达变化,无论是对心血管疾病的预防和治疗,还是对药物进行系统、客观评价,都具有重要的理论和临床意义。研究目的:通过对H9c2大鼠心肌细胞的培养,观察加参方（Jia-shen Prescription,JSP）对H2O2诱导的H9c2大鼠心肌细胞凋亡的干预作用,并探讨其作用机制。方法:1.药液配制（加参方溶液,H2O2溶液,MTT溶液）2.常规培养H9c2大鼠心肌细胞3.MTT法验证H2O2诱导心肌细胞损伤模型,筛选加参方最适给药浓度4.显微镜下观察H2O2诱导心肌细胞损伤模型及给药后各组细胞形态学变化5.DAPI染色法显微镜下观察心肌细胞凋亡6.利用流式细胞术检测H2O2诱导的心肌细胞凋亡率7.RT-PCR检测Caspase-3,Bax,Bcl-2 m RNA表达8.Western Blot检测Caspase-3,Bax,Bcl-2蛋白表达结果:1.H2O2 50μM作用6 h诱导心肌细胞损伤2.加参方0.3 mg/ml为最适干预浓度,镜下可见加参方0.3 mg/ml干预后细胞形态明显改善。3.DAPI染色法证实H2O2诱导心肌细胞凋亡,加参方抑制心肌细胞凋亡4.流式细胞术明确H2O2诱导心肌细胞凋亡,加参方降低心肌细胞凋亡率5.加参方可参与调节Caspase-3,Bax,Bcl-2 m RNA表达6.加参方可参与调节Caspase-3,Bax,Bcl-2蛋白表达结论:1.将H9c2大鼠心肌细胞暴露于50μM H2O2溶液6 h,可以诱导心肌细胞凋亡模型;2.加参方0.3 mg/ml对上述条件下H2O2诱导H9c2心肌细胞凋亡具有显著的抑制作用;3.加参方通过调节Bax、Caspase-3、Bcl-2等凋亡因子的表达,从而起到减弱心肌细胞凋亡的作用。