【摘 要】
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全世界每年因癌症死亡人数达700多万,而且这一数字还将快速上升。非小细胞肺癌(NSCLC)居全球癌症死因首位,多数患者确诊时已处于晚期,失去手术治疗机会。尽管临床治疗有了较
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全世界每年因癌症死亡人数达700多万,而且这一数字还将快速上升。非小细胞肺癌(NSCLC)居全球癌症死因首位,多数患者确诊时已处于晚期,失去手术治疗机会。尽管临床治疗有了较大的进展,但预后仍不理想,5年的生存率较低。本文拟对云南省两个地方性非小肺癌的治病机制进行探索,以期为肺癌的诊断治疗提供帮助。本文针对microRNA-218对人肺腺癌细胞、个旧肺鳞癌细胞和宣威肺腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡的影响进行研究。通过(1)检测miR-218在几株目的细胞株中的表达情况;(2)采用Real-time PCR法和蛋白免疫印迹检法测转染了miR-218 mimics质粒后的上述3株肺癌细胞中miR-218靶基因PTEN、BCL-2、BMI-1和YY-1的mRNA和蛋白的表达水平;(3)用MTT增殖法和细胞划痕实验分别检测转染了miR-218 mimics后3株肺癌细胞各自的增殖及迁移能力;(4)用透射电子显微镜和流式细胞法(FCM法)分别对3株肺癌细胞转染后的凋亡情况进行定性及定量分析的方法探索。结果显示在NSCLC中miR-218的表达与正常的肺上皮细胞中的miR-218表达相比较低;通过转染miR-218的mimics质粒后,肺癌的这3株细胞其转染组的miR-218水平都升高,相关抑癌分子PTEN和YY-1表达水平均升高,相关癌基因BCL-2和BMI-1表达水平均降低。与空白对照比,过表达组各株的功能在增长、转移等方面均显著降低,同时凋亡明显增加。结果表明miRNA-218 mimics的转入显著抑制了NCI-H157、YTMLC-90和XWLC-05的增长能力,诱导细胞坏死及凋亡;转染miR-218可显著抑制BCL-2和BMI1的表达并显著上调PTEN和YY1的表达。推测miRNA-218抑制肺癌的机制可能通过下调BCL-2、BMI-1基因及上调PTEN、YY1基因来介导。此外,通过普通肺癌与这三种肺癌分子机制的的分析比较,从分子遗传学的角度并不支持个旧肺鳞癌(YTMLC-90)和宣威肺腺癌(XWLC-05)是特殊种类的肺癌的判断。
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