间歇性低压低氧预处理对真皮下血管网皮片周缘血运建立的研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qian_betty
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目的:观察间歇性低压低氧预处理对SD大鼠带真皮下血管网皮片周缘血管化进程、细胞增殖以及皮片成活面积的影响。皮肤移植是手外科、烧伤整形科等科室常用治疗方法,皮片一般可分为中厚和全厚皮片,而带真皮下毛细血管网皮片是一种最厚皮片,包含了表皮、真皮和真皮下血管网及其间少许皮下脂肪,因其富含弹力纤维、腺体、毛细血管和少许脂肪,完全存活后较全厚皮片更柔软、松动而有弹性、耐压磨、收缩少、感觉功能恢复较好,且无需二期行去脂修薄术治疗。移植皮片的成活主要是靠皮片与受区之间尽早建立充分的血运,而血管形成(即组织中新生血管的增殖和形成过程)是建立血运的基础和关键。带真皮下血管网移植皮肤血运的建立方式可分为移植皮肤创缘及基底的血管网与受区血管网建立广泛的吻合。有实验表明真皮下血管网皮片边缘血管的吻接是皮片血运重建的主要途径,但边缘建立的血供有限,覆盖大面积无血管区时皮片中央会出现坏死。间歇性低压低氧预处理(intermittent hypobaric hypoxia preconditioning, IHH-PC)可提高机体多种器官组织对缺血、缺氧及缺血/再灌注损伤等损伤的耐受能力,目前认为其保护机制是多因素、多机制参与的过程,已发现多种调控基因及其表达物、生长因子及蛋白质参与其中,其中包括血管内皮生长因子(VEGF)。血管内皮生长因子可特异地作用于血管内皮细胞,加速创面的毛细血管化,促进组织内毛细血管大量增殖,加速局部血循环的建立。本实验旨在观察间歇性低压低氧预处理应用于带真皮下血管网皮片仅靠周缘建立血供时的成活面积和血运的建立情况,为临床上在无血管区创面行皮肤移植术提供实验依据和临床依据。方法:将45只健康SD大鼠(120-150g)随机分为A、B、C三组。A组:对照组(Con);B组:间歇性低压低氧同处理组(IHH);C组:间歇性低压低氧预处理组(IHH-PC)。三组大鼠均于背部相对固定位置形成大小分别为1×1cm2、2×2cm2、3×3cm2的带真皮下血管网皮片。带真皮下血管网皮片的形成过程如下:逐层切开皮肤、皮下组织,于深筋膜浅面将皮片掀起(包括背部肉膜层,在背部肌膜浅面进行),创面彻底止血,片状硅胶膜覆盖创面以阻断皮片基底的血运建立,将皮片顺时针扭转180°,直接原位缝合。间歇性低压低氧预处理及间歇性低压低氧同处理方案:IHH-PC组动物于切取皮片前一周即置于低压氧舱(河北医科大学生理学教研室低压氧实验室),IHH组动物于切取皮片术后第一天置于低压氧舱(河北医科大学生理学教研室低压氧实验室),实验舱内空气由真空泵逐渐抽出,舱内空气变稀薄,约15分钟达到相当于5000米海拔的大气环境(PO2:11.1%),两组实验动物每天均处于上述低压低氧环境内6小时,连续7天,每天进、出舱时间相对固定,舱温维持在17~20℃。对照组动物除不接受间歇性低压低氧处理外,其它条件与低压低氧动物相同。术后一周观察皮片的各项指标。观察指标:1、观察皮片的颜色、质地、弹性等情况。2、皮片成活面积:皮片形成后1周,数码相机记录图像分析测量皮片成活部分的最长径、最宽径,面积及面积成活百分比。3、组织学观察:于创缘周边切取组织制成切片,HE染色,光镜下观察炎性细胞浸润、纤维增生、毛细血管形成等组织学变化,并随机选取5个视野计算新生血管的数量,取平均值,进行统计学分析。结果:大体观察:45只大白鼠术后全部喂养成活,以皮片质地变硬、失去弹性、颜色变黑为判断皮片坏死的标准,用图像分析系统测量皮片成活面积。皮片切取范围1平方厘米的皮片成活面积:A组0.89000cm2,B和C组分别是0.90000、0.91000cm2,三组皮片成活平均宽度、成活面积均无明显统计学差异;切取范围4平方厘米的皮片成活面积:A组2.53000,B和C组分别是2.9500、3.4900cm2,三组皮片成活平均宽度、成活面积均有统计学意义(P<0.05),组间比较C组高于A、B两组,B组高于A组;切取范围9平方厘米的皮片成活面积:A组4.2800,B和C组分别是5.0700、6.0200cm2,三组皮片成活平均宽度、成活面积均有统计学意义(P<0.05),组间比较C组高于A、B两组,B组高于A组。组织学观察:A组:皮肤层次破坏、炎性细胞浸润明显,罕见毛细血管存在。B组:皮肤层次较完整,炎性细胞浸润较多,可见部分保留的血管及少量毛细血管。C组:皮肤层次完整,炎性细胞浸润较少,真皮层可见较多毛细血管及大管腔血管。上述组织切片在100倍光镜下,每张切片随机计算5个视野中毛细血管断面个数,取平均值。切取范围1平方厘米的皮片:A组毛细血管的数量是3.25,B和C组分别是3.15、3.35;切取范围4平方厘米的皮片:A组毛细血管的数量是2.81,B和C组分别是3.19、5.03;切取范围9平方厘米的皮片:A组毛细血管的数量是2.73,B和C组分别是3.64、5.52。三组皮片新生毛细血管数量均有统计学意义(P<0.05),C组高于A、B组,B组高于A组。结论:IHH-PC可明显提高带真皮下血管网皮片抗缺血、缺氧能力同时改善皮片血运重建过程,IHH亦可提高皮片对缺血、缺氧的耐受性并改善皮片周缘血运重建。
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