精液保存是动物生殖技术中的关键一环,是提高精液利用率的重要手段之一。在实际生产中,精子的长期储存会导致精子细胞的生物学和功能改变。且目前有关乙酰水杨酸(ASA)、水杨酸钠(SS)、Y-27632在绵羊精液有效保存中的相关研究较少。本试验为能长期保存精液同时降低保存过程中精子受损情况。随机选择健壮的杜泊公羊作为试验对象,分别在20℃或4℃情况下添加不同浓度乙酰水杨酸、水杨酸钠、Y-27632,探究这三者在绵羊精液长期保存中的作用及效果。旨在改善公羊精液长时间保存后精子的活力、运动性、顶体完整性、质膜完整性和受精能力以及核完整性。研究结果显示,在20℃条件下,分别加入ASA和SS后,可显著提高绵羊精子的保存活力(P<0.05)。50mM ASA处理组和20mM SS处理组的精子在保存过程中的活力显著高于其它各组(P<0.05)。同时也有助于提高顶体、质膜的完整率,并且显著高于对照组(P<0.05);与空白组相比,核完整率基本无显著差异,证明二者对精子核在试验情况下并无损伤。4℃保存条件下,ASA和SS保存精子的结果分别同20℃结果基本一致。但有效延长了保存时间。保存至13d时,50mM的ASA和20mM的SS处理下的精子活力分别达到62.43±3.32和50.00±0.71(%),显著高于空白组和其余试验组(P<0.05);同时均能提高精子顶体和质膜完整率,延缓精子顶体和质膜完整率下降趋势。Y-27632作为一种选择性ROCK1(p160ROCK)抑制剂,在该试验中20mM的Y-27632极显著延长了精子的保存时间,在保存18d时活力达到60.73±3.97(%),而空白组精子活力<10(%)(P<0.05);保存13d后,20mM处理组的精子顶体完整率和质膜完整率均大部分显著高于空白对照组(P<0.05);且与空白组相比,核完整率无显著差异,证明Y-27632对精子核在试验情况下并无损伤。综上所述,适量的ASA、SS均能在20℃和4℃保存的情况下显著延长保存时间,并改善保存后精子活力,顶体和质膜完整性、精子运动性和不损伤核。而20mM的Y-27632在4℃保存时保存效果较前二者更好。另外,该试验中ASA与SS相较于Y-27632成本低,可在实践中应用,而Y-27632对精子的保存作用也值得深入研究,探究其作用机制。