荷载脂质体在Hela细胞和小鼠耳蜗螺旋神经元中的表达差异

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:robinleslie
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察荷载脂质体在体外转染人宫颈癌细胞(Hela)及小鼠耳蜗螺旋神经节神经元(SGNs)的转染率差异,为制备纳米基因载体的研究提供基础数据。 方法:(1)建立机械分离体外培养小鼠SGNs的方法,并进行β3-Tubulin免疫组化染色鉴定;(2)利用阳离子脂质体作为载体,将携带神经营养素3(NT-3)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组质粒pEGFPC2-NT3分别对SGNs及Hela细胞进行瞬时转染,分别计算其转染率;(3)用免疫组化(DAB)法观察EGFP和NT-3在两种细胞中的表达差异。 结果:(1)耳蜗螺旋神经节神经元培养12小时贴壁生长,72小时后细胞最多,约50个/c㎡。经β3-Tubulin免疫组化染色,显示这些细胞为神经细胞;(2)荧光显微镜下观察Hela细胞转染率约60%,SGNs转染率约10%~15%;(3)GFP、NT-3免疫组化染色显示,两种分子在Hela细胞中的转染率均显著大于在SGNs中的转染率。值得注意的是,在这两种细胞中,NT-3的转染率均大于GFP。 结论:(1)对同一种荷载脂质体而言,Hela细胞的体外基因转染率明显大于SGNs;(2)在同一类培养的细胞系中,治疗基因NT-3的转染率大于报告基因EGFP。结果提示,向神经元转染治疗基因需要更高效的基因载体;以报告基因的表达体现的转染率并不一定是治疗基因真实的转染率或表达情况,在分析体外基因转染结果时需要予以考虑。
其他文献
目的:研究发育期大鼠反复惊厥后大脑皮质糖皮质激素受体(GR)表达的变化及银杏叶提取物和孕酮干预对其的影响,探讨GR在婴幼儿期惊厥性脑损伤发病机制中的作用及银杏叶提取物和孕酮对脑损伤的可能保护机制。方法:生后7天的SD大鼠共96只,随机分成四组:正常对照组、惊厥组、银杏叶提取物干预组及孕酮干预组,每组24只,每组大鼠又随机分成三部分。通过三氟乙醚反复吸入(连续6天,每天1次)制作发育期大鼠惊厥动物模
论述了田间作业质量标准的概念、坚持田间作业质量标准的意义及坚持田间作业质量标准的重要性;分析了我省田间作业质量的现状,提出实施田间作业质量标准的建议;并指出质量效益型
兴趣是最好的老师。兴趣能够激发学生的求知欲望,培养学生的兴趣,启发学生在创造和表现美的活动中提高自身的审美素养和审美能力。没有丝毫的兴趣强制性的学习,将会扼杀学生探究
期刊
冬小麦全生育期地膜覆盖穴播栽培技术,是甘肃省农科院李守谦研究员创立的节水抗旱高产栽培新技术(简称地膜小麦).农业部把这项新技术列为1997年全国推广的十大重点技术之一.
体育是小学教学中重要的组成部分,其在提高学生体质。丰富学生生活方面都起着十分重要的作用,但就目前的发展现状来看,很多小学教师和学生对其是不够重视的,甚至将体育课作为其他
摘 要:实验教学和考核在初中化学中对提高教育教学质量、对开发学生智力、培养学生动手能力和科学精神、对学校实验室建设有着不可替代的作用,现在和今后教学对加强实验教学和考核是一种必然和发展趋势。  关键词: 实验 教学 考核 教学质量  实验教学是深化教育改革,全面推进素质教育的重要环节,是推进实施新课程标准,提高教学质量,培养全面发展一代新人的有效途径。《中国教育改革和发展纲要》中明确提出:“要进一
期刊
目的吉兰-巴雷综合征是一种常见的累及周围神经系统的自身免疫性疾病,其主要病理特征为周围神经的髓鞘脱失和炎性细胞浸润,其病因和发病机制尚不十分清楚。实验性自身免疫性
目的:探讨Reichert眼反应分析仪(Reichert Ocular ResponseAnalyzer,ORA)测量正常人眼压的准确性及与中央角膜厚度(centralcorneal thickness,CCT)的相关性。研究ORA所测正常