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蔓枯病(Gummy stem b1ight)是由Didymella bryoniae真菌引起的一种全球性病害,常造成黄瓜(CucumissativusL.)不同程度的减产,病情加重时可严重影响黄瓜的商品化生产。黄瓜遗传背景狭窄,利用野生种酸黄瓜(Cucumis hystrix Chakr.,2n=24)中优异基因作为背景,鉴定筛选黄瓜-酸黄瓜渐渗系中对蔓枯病抗性表现较好的材料,明确黄瓜叶片中病原菌的侵染过程及探究其相关抗性途径,这对黄瓜抗蔓枯病研究具有重要意义。本论文通过黄瓜-酸黄瓜渐渗系抗蔓枯病鉴定,接种蔓枯病菌后进行电镜观察,明确病原菌的侵染过程及寄主组织病理结构的变化,并利用抗感材料对黄瓜抗蔓枯病防御信号途径中相关基因的表达进行了分析。主要研究结果如下:1.黄瓜-酸黄瓜渐渗系的验证及其抗蔓枯病鉴定以黄瓜-酸黄瓜渐渗系和感病对照’北京截头’为试材,对黄瓜-酸黄瓜86份渐渗系材料进行了田间农艺性状观察,该渐渗系群体中具有部分野生酸黄瓜特有的性状,确定为种间杂交后代。通过对黄瓜-酸黄瓜渐渗系SSR分子标记鉴定,利用黄瓜染色体上995对SSR标记对双亲之间的多态性进行筛选,共检测出359对标记在亲本间具有多态性,多态性比率为35.8%。利用苗期人工接种技术对黄瓜-酸黄瓜渐渗系进行抗蔓枯病材料筛选,从86份渐渗系中共筛选出8份对蔓枯病抗性良好的材料,分别为CSIL2、CSIL41、CSIL49、CSIL52、CSIL57、CSIL58、CSIL59、CSIL72,占材料总数的9%。2.黄瓜蔓枯病菌侵染过程的超微观察以黄瓜-酸黄瓜抗蔓枯病渐渗系CSIL72和感病材料’北京截头’为试材,在人工接种蔓枯病菌后的不同时间段进行取样观察。结果显示:孢子在接种8 h后开始萌发,芽管伸长、菌丝生长并分枝,最后呈网状分布于细胞表面;通过观察菌丝生长速度可知接种后3 d内是该病菌与寄主识别反应的关键时期;病原菌侵染寄主时菌丝顶端膨大形成附着胞,并以直接侵染方式进行入寄主组织和细胞;寄主细胞随着接种时间的延长出现质壁分离、叶绿体排列凌乱直至解体等现象。3.黄瓜抗蔓枯病防御信号途径中相关基因的表达分析以黄瓜-酸黄瓜抗蔓枯病渐渗系CSIL72和感病材料’北京截头’为试材,在接种蔓枯病菌后不同时间段(0h、12 h、24 h、2d、3d、5 d、7d)进行取样,利用荧光定量PCR技术对样品中乙烯、茉莉酸、水杨酸及病程相关蛋白等防御信号途径中相关基因进行表达分析。结果显示:茉莉酸和水杨酸防御信号途径表达趋势一致,表现为相互协同的作用,这两种防御途径相关基因(PDF1.2、C0I1、NPR1、EDS5)及病程相关蛋白基因(PR2、PR9)在CSIL72中的表达量显著高于’北京截头’;乙烯防御信号途径与水杨酸和茉莉酸表达趋势不同,该防御信号途径的相关基因(CTR1、ETR、EIN2、ACS)在’北京截头’中的表达量高于CSIL72。