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已有的研究表明,特殊生态环境下的微生物与特殊的次生代谢产物有紧密的关系,通过药用植物内生真菌多样性研究,寻找与宿主相同或相似的活性成分的菌株,从内生菌中筛选和分离活性高、广谱和安全的抗菌物质,利用微生物发酵技术产生增效、减毒、高产的内生菌,扩大药源,已成为当今药用植物研究的热点问题之华南忍冬Lonicera confusa DC为忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬属(Lonicera)植物,俗称山银花,又称大银花、土银花,收载于历版《中国药典》(一部)中,山银花与金银花一样具有清热解毒,凉散风热的功效,临床用于治疗呼吸道感染、细菌性感染、急性扁桃腺炎、高热症、梅核气(慢性咽炎)、小儿肺炎、腮腺炎等40多个病种。并被广泛运用于食品、饮料、药品、保健品、日用化工等方面,如牙膏、袋泡茶等。本研究选择具抗菌消炎背景的传统中药山银花为研究对象,对其开展内生菌的种群结构特征、抗菌活性菌株的筛选的研究,对了解我国传统中药原植物内生菌资源的生物多样性,充分发挥我国中草药的资源优势,发掘具抗菌、抗肿瘤类药用植物内生真菌资源具有重要的意义。本文的主要研究内容如下:1国内外研究综述查阅了大量与本研究相关的国内外文献资料,归纳总结了山银花种质资源的研究现状及药用植物内生菌的研究概况,内容涵盖了分类学、化学成分及药理药效、药用植物内生菌的活性成分、对药用植物的促进生长作用、内生菌研究的材料选择及存在问题等方面的研究进展。2华南忍冬内生菌的初步研究华南忍冬内生菌的多样性研究——通过不同部位不同季节华南忍冬内生菌的分离、纯化、鉴定,发现华南忍冬内生菌具有物种多样性。本实验共分离得到145株内生真菌,它们在不同的组织内的存在情况差别比较明显,在不同季节的分布情况差别也较大。可将其分属于13个属,另有2株未能鉴定。分离得到124株内生细菌,可分为革兰氏阳性菌78株、革兰氏阴性菌46株,或杆菌37株、球菌87株。华南忍冬内生菌的抑菌实验——通过对华南忍冬内生菌抑菌作用研究,发现内生菌对致病菌抑制作用具有差异性。其中,对致病菌抑制作用较强,能产生明显抑菌圈的有:3株内生细菌可抑制绿脓杆菌,3株内生细菌能抑制金黄色葡萄球菌,1株内生细菌可抑制大肠杆菌;而抑制作用较弱,仅拮抗致病菌生长的有:2株内生真菌能拮抗金黄色葡萄球菌生长,1株内生细菌可同时对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的生长产生明显的拮抗作用。华南忍冬内生菌对组培苗生长的影响——考察了具有抑菌活性的内生菌对华南忍冬无菌苗生长的影响。结果表明,华南忍冬内生菌对离体培养物的生长没有明显的促进作用。华南忍冬不同部位浸提物抑菌作用初探实验——考察了华南忍冬根、茎、叶、花4个组织的乙醇提取物对4种致病细菌的抑制作用,发现4个组织的浸提物均可对大肠杆菌产生显著的抑制作用,根、茎、花的浸提物还可明显抑制枯草芽孢杆菌的生长。但都对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌没有抑制作用。