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研究目的:糖尿病是以外周胰岛素抵抗和胰岛素分泌不足、持续高血糖为主要特征的内分泌代谢病。Toll样受体(TLRs)介导的炎症通路及炎症因子在2型糖尿病(T2DM)及其血管并发症中发挥着重要作用,然而TLR3、TRIF和TRAF3的基因多态性与T2DM及其血管并发症的关联尚不明确。本研究围绕TLR3、TRIF和TRAF3的基因多态性与T2DM及其血管并发症的关系开展研究,同时探讨基因与基因交互作用、基因与环境交互作用在T2DM及其血管并发症发生中的作用,为糖尿病及其血管并发症的早期发现和早期干预提供参考。研究方法:1.本研究采用病例-对照研究设计,2型糖尿病组(552例)与健康对照组(552例),按性别与年龄(±5岁)进行1:1配对。在T2DM病人组中设立3个比较组:T2DM微血管并发症组(221例)与单纯T2DM组(128例);T2DM大血管并发症组(63例)与单纯T2DM组(128例);T2DM微血管大血管并发症组(71例)与单纯T2DM组(128例)。2.采用流行病学调查问卷收集研究对象的基本人口学特征和临床实验室生化检查指标资料,包括年龄、性别、婚姻、职业、家族史、身高、体重、吸烟状况、饮酒状况和总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、糖化血红蛋白等。3.使用Hapmap数据库及haploview 4.2软件筛选TLR3、TRIF和TRAF3的单核苷酸多态性位点(SNPs),采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行基因分型检测。4.应用t检验对计量资料进行统计分析、采用χ~2检验对计数资料进行统计分析;应用条件或非条件logistic回归分析探讨TLR3、TRIF和TRAF3基因型与T2DM及其血管并发症的关系;使用在线软件SHEsis分析基因单倍型与T2DM及其血管并发症的关联;使用多因子降维软件(MDR)探讨基因-基因、基因-环境交互作用与T2DM及血管病并发症的关联。研究结果:1.与健康对照组相比,T2DM组的体重指数(BMI)和甘油三酯(TG)水平高于健康对照组(P<0.05),低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)水平低于健康对照组(P<0.05)。与单纯T2DM组相比,T2DM微血管并发症组的基本特征与单纯T2DM组差异无统计学意义(P>0.05);T2DM大血管并发症组的平均年龄大于单纯T2DM组(P<0.05);T2DM同时合并微血管和大血管并发症组的平均年龄和糖化血红蛋白(HbA1c)水平均高于单纯T2DM组(P<0.05)。2.筛选TLR3、TRIF和TRAF3基因的8个SNP位点,其中TLR3基因1个SNP位点(rs3775291)、TRIF基因1个SNP位点(rs8120)、TRAF3基因6个SNP位点(rs12435483、rs7156191、rs3803286、rs12588538、rs2144826、rs12147254)。在等位基因模型中,个体在TRAF3 rs12435483位点携带T等位基因发生2型糖尿病的风险是携带C等位基因的1.21倍(T vs.C:OR=1.21;95%CI:1.01-1.44;P=0.036)。在TLR3、TRIF和TRAF3的基因型与2型糖尿病及血管并发症的关联中:校正体重指数(BMI)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)和甘油三脂(TG)变量后,未发现TLR3和TRAF3基因型与T2DM的关联有统计学差异;校正年龄协变量后,T2DM病人携带TRAF3 rs12147254 GA基因型发生大血管的风险是携带GG基因型的2.79倍(GA vs.GG:OR=2.79,95%CI=1.09-7.13,P=0.032);T2DM病人携带TRAF3 rs12147254 AA+GA基因型发生大血管的风险是携带GG基因型的2.55倍(AA+GA vs.GG:OR=2.55,95%CI=1.03-6.29,P=0.043)。3.单倍型分析结果显示:个体携带TRAF3的GTGT单倍型发生T2DM的风险是携带CTGC单倍型个体的0.34倍(OR=0.34,95%CI=0.13-0.86,P=0.018)。4.MDR分析结果显示:二阶交互作用(TRAF3 rs12435483*LDL)与三阶交互作用(TRAF3 rs12435483*BMI*HDL)模型与2型糖尿病存在关联。在TRAF3 rs12435483位点携带TT+CT、BMI≥24kg/m~2及HDL<1.04mmol/L的个体患T2DM的风险是参照组(在TRAF3 rs12435483位点携带CC、BMI<24kg/m~2及HDL≥1.04mmol/L的个体)的25.32倍(OR=25.32,95%CI:13.24-48.42,P<0.001)。研究结论:TRAF3基因的SNPs与脂代谢相关环境因素(LDL、BMI、HDL)的交互作用可能影响T2DM及其血管并发症的发生风险,其机制需进一步验证。