甜瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)和甜瓜细菌性角斑病菌(P.syringae pv.lachrymas)是危害甜瓜(Cucumismelo)作物的两种重要的细菌性病害,对全球的瓜类产业造成了严重的影响。这两种病害通常混合发生,且发病症状相似,不易区分,给田间防治带来了很多不便。为了高效准确的在田间对这两种病害进行区分,本论文以甜瓜细菌性果斑病菌为对象,制备高亲和力单克隆抗体和多克隆抗体,组建了基于双抗体夹心原理的免疫层析试纸条,建立了一种高效、简便的胶体金免疫层析分析方法(immunochromatography assay,ICA),实现了对甜瓜细菌性果斑病菌的田间快速检测。与传统的分子检测方法相比,基于抗原抗体特异性结合的免疫层析试纸条具有更加快速高效的优势,本文主要介绍免疫层析试纸条的开发以及检测效果,现从以下几个方面进行介绍:(1)通过杂交瘤细胞技术成功制备了两株能够稳定分泌抗细菌性果斑病菌的单克隆抗体杂交瘤细胞株。同时,通过兔免疫获得了多克隆抗体抗血清。通过抗体纯化获得了单克隆抗体和多克隆抗体,为免疫检测方法的建立提供了材料。(2)以胶体金标记单克隆抗体5A3为识别抗体,以多克隆抗体9154为捕获抗体,建立了一种基于双抗体夹心原理的免疫层析分析(ICA)方法,实现了对细菌性果斑病菌的田间快速检测。针对制备的免疫层析试纸条,进行了试纸条参数及工作条件的优化。在定性检测中,通过裸眼观察,ICA对果斑病菌的检测限为1×105CFU/mL,且与细菌性角斑病菌无交叉反应,具有较强的特异性。因此,本研究研制的ICA试纸条不仅实现了对甜瓜细菌性果斑病菌的快速、特异性检测,而且在田间检测中能与细菌性角斑病菌进行有效区分。(3)我们以双热点模式表面增强拉曼(surface-enhanced Raman scattering,SERS)分析方法为理论依据,构建了一个快速高效检测甜瓜果斑病菌的新的检测方法,并初步分析了该方法的可行性。