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目的:胰腺癌作为一种缺氧性肿瘤,恶性程度高,发展迅速,对放、化疗敏感性低。控制胰腺癌的缺氧应答,抑制与缺氧相关的靶分子,可能成为治疗胰腺癌的新进展。缺氧诱导因子-1是肿瘤细胞维持氧平衡的重要的转录调节因子,在肿瘤缺氧应答中起关键作用,是肿瘤细胞在缺氧状态下维持生长、浸润与转移的关键因素。本课题拟选取人胰腺癌PC-3细胞系,通过给予特异性抑制剂YC-1,考察在常氧和缺氧状况下,YC-1对胰腺癌PC-3细胞HIF-1转录活性的调控作用,并进一步探索抑制HIF-1α蛋白对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响,为将HIF-1作为抗胰腺癌治疗的新的分子靶点提供理论依据。方法:常氧和缺氧条件下体外培养胰腺癌PC-3细胞株,经不同浓度YC-1作用后,应用免疫细胞化学染色方法检测HIF-1α蛋白表达情况;Western Blot检测HIF-1α蛋白表达水平;半定量RT-PCR检测VEGF和GPI的转录水平;MTT法检测YC-1对PC-3细胞增殖活性的影响;流式细胞技术分析PC-3细胞凋亡率。结果:和常氧组比较,缺氧对照组PC-3细胞胞核内HIF-1α蛋白呈强表达。YC-1为100μmol/L时,HIF-1α蛋白从胞核表达转向胞浆表达增多,胞核偶见表达。YC-1对HIF-1α蛋白表达水平的抑制作用呈现为剂量依赖性,当其浓度为100μmol/L时,对HIF-1α蛋白抑制作用最大。YC-1抑制PC-3细胞内HIF-1靶基因VEGF和GPI的转录水平,其对VEGF和GPI mRNA的表达水平呈剂量依赖性抑制作用。YC-1抑制PC-3细胞的增殖,相对于0μmol/L组,100μmol/L组PC-3细胞增殖抑制率和凋亡率显著升高。结论:缺氧状态下,YC-1抑制人胰腺癌PC-3细胞HIF-1的转录活性,这种抑制作用可能和YC-1抑制HIF-1α蛋白表达,并促使HIF-1α蛋白从胞核向胞浆转移有关。YC-1可通过抑制HIF-1的转录活性而抑制胰腺癌PC-3细胞的生长和增殖。