巨桉(Eucalyptus grandis)人工林水溶酚类化感物质鉴定及其对植物的生理生态作用

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桉树(Eucalyptus)的化感作用一直以来都是一个复杂且颇具争议的问题。酚类物质因其较大的水溶性和成盐性使其更易进入土壤,化感作用最强。目前有关桉树化感作用机制研究还停留在桉树器官及土壤水浸提液对植物的生理作用上,这难以深入揭示桉树化感物质释放和活性表达受经营措施和其它环境因子影响的生态作用机制。基于此,本研究以一个年龄序列巨桉(Eucalyptus grandis)人工林为例,筛选巨桉产生的主效水溶酚类物质并揭示其对植物的生理作用;开展密度控制实验,进一步揭示水溶酚类物质化感效应的生态影响因素,为巨桉人工林的科学管理和可持续发展提供理论依据。结果表明:1)超高效液相色谱与质谱联用(UPLC-MS)鉴定结果发现,一个年龄序列(2、4、6、8和10年)巨桉人工林凋落叶、根系和根际土壤中水溶酚类物质共17种,其中酚酸类物质7种,黄酮类物质10种。巨桉凋落叶和根系中酚类物质的浓度高于根际土壤中的浓度;巨桉凋落叶和根系中大多数酚酸类物质和一些黄酮类物质在低林龄浓度较高;而在巨桉根际土壤中,大多数酚类物质的浓度在各林龄间无显著变化。发现4年和8年是巨桉产生和释放水溶酚类物质的重要时间节点。典范相关分析(CCA)发现,在凋落叶和根系中,酚类物质受林龄、土壤含水量、土壤容重、土壤有机质含量、植物Shannon-Wiener指数这几种因子影响较大;在根际土壤中,环境因子对酚类物质影响较小。2)通过外源添加实验发现,除6-甲基水杨酸在低浓度对绿豆萌发率有促进作用之外,其余处理对受体植物萌发率均呈抑制作用;三种酚酸物质处理下,对受体植物苗高、根长、苗/根鲜重比及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)酶活性呈低促高抑作用,且具浓度效应;除水杨酸对三种受体植物可溶性蛋白含量、6-甲基水杨酸和4-羟基苯甲酸对绿豆可溶性蛋白含量、6-甲基水杨酸对三种受体植物可溶性糖含量呈低促高抑之外,其余处理对受体植物渗透调节物质在各浓度均呈促进作用;对受体植物体内MDA含量呈低抑高促作用,对根系活力呈低促高抑作用。3)将一个年龄序列及不同密度处理巨桉中水溶酚类物质鉴定结果进行比对发现,共有物质有水杨酸(Salicylic acid)、4-羟基苯甲酸(4-Hydroxybenzoic acid)、没食子酸(Gallic acid)、5,7-二羟基黄酮(Chrysin)和表儿茶素(Epicatechin)5种。4年生巨桉人工林中5,7-二羟基黄酮和表儿茶素及8年生巨桉人工林中4-羟基苯甲酸、没食子酸、5,7-二羟基黄酮和表儿茶素在高密度(D1和D2)林分中浓度相对较高;4年生巨桉人工林中水杨酸和没食子酸浓度随密度降低先下降后升高,而8年生巨桉人工林中水杨酸浓度随密度降低显著升高,且不同林分密度中大多数酚类物质在4年生巨桉人工林中的浓度高于8年。4年和8年不同密度巨桉人工林林下灌木层以铁仔,油茶和琴叶榕为优势种,铁芒萁和空心莲子草为草本层的优势种。随密度降低,4年和8年巨桉林下植物物种数均有增加的趋势,且8年生林下植物物种数较4年生高。CCA分析结果发现,林龄、林分密度、植物Shannon-Wiener指数、土壤含水量、土壤pH和土壤容重对水杨酸、4-羟基苯甲酸和没食子酸影响较大,其余两物质受环境因子影响较小。综上,巨桉人工林主效水溶酚类化感物质包括水杨酸、6-甲基水杨酸和4-羟基苯甲酸。其中水杨酸和4-羟基苯甲酸作用最强,这些物质含量随林龄呈现显著变化,它们对受体植物萌发、生长和生理指标均有显著影响且具浓度效应。同时,巨桉分泌的水溶酚类化感物质还受密度、林龄、植物Shannon-Wiener指数和密度等管理措施造成的土壤含水量、土壤pH、土壤容重等环境因子变化的影响。
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