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乳酸菌是人体消化道内正常菌群之一,安全无毒,无致病性,无致癌性,已在世界范围内被公认为‘’GRAS"等级的食品级微生物。大量的实验研究表明,乳酸菌在预防和治疗溃疡性结肠炎、高血压以及结肠癌方面具有潜在的应用价值。目前,研制与开发具有抗结肠癌功能的乳酸菌已成为国内外专家学者研究的热点与前沿。本课题通过给BALB/c鼠腹腔注射或口腔灌服4株相同量的乳酸菌,观察不同株乳酸菌对巨噬细胞吞噬能力的影响及对结肠癌BALB/c荷瘤鼠免疫功能的影响,从多角度探讨不同乳酸菌对BALB/c荷瘤鼠巨噬细胞、树突状细胞、CD4+T、CD8+T及细胞因子TNF的免疫功能的调节作用。具体研究内容及结果如下1.乳酸菌对腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响：首先将4株不同的乳酸菌腹腔注射BALB/c鼠,连续注射2W。间隔2d后,每只BALB/c小鼠腹腔注射CFDA-SE标记的健康鸡红细胞；分别在注射鸡红细胞后的第3d与第5d脱臼处死小鼠,从腹腔中取出腹水,收集巨噬细胞,采用流式细胞仪技术,检测腹腔巨噬细胞吞噬CFDA-SE标记的健康鸡红细胞的能力。结果显示,所采用的乳酸菌均能够增强腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。其中,乳酸菌ATCC4356、ATCC55730对腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力还具有时间依赖性。2.结肠癌荷瘤模型建立：收集培养于37℃2% FCS RPMI1640培养液中的细胞HCT-116,将其接种于BALB/c小鼠的右后肢皮下,接种细胞的数量为0.8×106/mL/只。接种5d后,可观察到大部分小鼠右后肢皮下有一约绿豆大小结节。本实验中,结肠癌小鼠荷瘤模型的成功建立为下一步研究乳酸菌抗结肠癌作用研究奠定了基础。3.乳酸菌抗结肠癌作用及免疫效果检测：BALB/c小鼠长出皮下结节后,测定荷瘤鼠的体重与肿瘤的体积。第7d,脱颈处死结肠癌荷瘤鼠,剥离肿瘤称重,计算其抑瘤率；采用流式细胞仪技术,检测树突状细胞,巨噬细胞,细胞因子TNF,CD4、CD8+T细胞数量的变化；并观察BALB/c荷瘤鼠脾脏和肿瘤组织H&E染色图片。实验结果显示,所采用的乳酸菌增强小鼠的体重；降低肿瘤平均体积和重量。流式细胞仪技术检测的结果表明乳酸菌能够提高结肠癌BALB/c荷瘤鼠机体的免疫力,对肿瘤的生长具有显著地抑制作用。本研究表明,乳酸菌通过增强巨噬细胞的吞噬功能及抗原递呈功能,增加细胞因子TNF的分泌,提高CD11c+树突状细胞、F4/80+巨噬细胞、TNF细胞因子、CD4+T细胞、CD8+T细胞的表达量,发挥抗结肠癌的功能。本研究为乳酸菌作为免疫调节剂防治结肠癌奠定了理论基础。