螯合剂对金属-Aβ40/42聚集体解离的促进作用

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阿尔茨海默症是最常见的一种老年痴呆症。p淀粉样多肽(Aβ)沉积是阿尔茨海默症的重要病理特征之一。研究发现,Cu2+、Zn2+等离子可诱导Aβ聚集形成不可溶的沉淀,AD的发病中Aβ的沉积发挥着重要作用。本文采用两种荧光螯合剂,系统研究其对金属-Aβ聚集体形成的逆转作用。主要采用荧光光谱、紫外可见光谱、透射电镜、倒置荧光显微镜等对Aβ聚集体的解聚做了研究,并用MTT法测试了Aβ在解聚过程中毒性变化。本论文取得的结果包括:一、用荧光光谱仪测试了两种配体的荧光性质,包括pH、溶剂、各种金属离子对配体荧光的影响,最终选择含10%乙醇的Tris-HCl (pH 7.4)缓冲液作为以后实验的反应体系。两种配体对Cu2+、Zn2+均有响应。二、通过荧光法、BCA法检测配体对聚集体的解聚作用。发现配体可以将聚集体中金属离子夺去,但是聚集体只是一小部分发生解聚。三、透射电镜观察到配体可以使金属离子-Aβ聚合物发生不同程度的解聚。对Aβ40的解聚效果较Aβ42好一些。四、细胞实验证实FC-11可以跨过细胞膜。毒性实验发现FC-11-Cu2+、FC-12-Cu2+具有很强的细胞毒性。另一方面,从CuZ+-Aβ聚集体与配体作用后,对细胞的毒性大大增强,也证实了配体对Cu2+-Aβ聚集体中的Cu2+的螯合作用很强。
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