论文部分内容阅读
呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Viral, RSV)是近些年来在世界范围内能够引起婴幼儿下呼吸道感染最重要的病毒病原,其所致的肺炎临床症状较重,病死率较高,因此受到高度关注。RSV感染机体后能够使参与细胞免疫的T辅助细胞Th1/Th2的比例失衡,诱导相关细胞因子的表达,造成机体的免疫损害。RSV是Toll样受体(Toll-like receptors)重要的配体,能够诱导TLRs信号转导通路的活化,引起下游诸如IL-6、IL-8和IL-1β等细胞因子的分泌。导师汪受传教授研制的金欣口服液在前期的临床和实验研究中中被证实具有抗RSV感染和调节免疫等作用,其有效单体白藜芦醇亦有抗病毒的作用。因两者拮抗RSV感染的作用机制目前尚不明确,因此,本研究拟从RSV活化诱导的Toll样受体信号转导通路入手,探讨金欣口服液及白藜芦醇对RSV体内外感染模型相关炎症因子表达的调控作用,推测其在分子免疫学方面抗RSV肺炎的作用机制。目的：1观察RSV体内外感染模型IL-6、IL-8、IL-1β表达水平,探讨其在免疫学方面的作用机理。2观察金欣口服液及白藜芦醇对RSV体内外感染模型IL-6、IL-8、IL-1p表达水平的调控作用,探讨其在免疫学方面抗RSV感染的作用机理。方法：本实验采用实验动物学、细胞培养学、分子免疫学、ELISA法检测BALB/c小鼠肺泡灌洗液IL-1β及hep-2细胞上清IL-6和IL-8的含量变化。实验数据采用Excel和SPSS17.0软件进行统计。结果：1体内实验：RSV感染BALB/c小鼠24h后IL-1β的表达量较之于正常组显著增加(P<0.01),金欣高预防组和等效预防组均能下调其表达且以等效预防组的下调作用更为明显(P<0.01)；当RSV感染BALB/c小鼠72h后,IL-1β的表达量较之于正常组也显著增加(P<0.05),但较24h的表达量稍有减少。金欣治疗组下调IL-1p表达的作用,两个高剂量组IL-1β的含量较之于RSV模型组也有所下降,但无统计学意义(P>0.05)；RSV感染BALB/c小鼠144h后IL-1β的表达量较之于24h、72h显著减少,但表达量仍高于正常组,而金欣口服液的两个剂量治疗组则均能下调其表达。2体外实验：①RSV感染Raw264.7细胞24h后上清中检测到IL-1β的表达量极低；②RSV感染hep-2细胞后24h时,RSV感染模型组中IL-6和IL-8的表达量均显著增高(P<0.01)；金欣组IL-6(P>0.05)和IL-8(P<0.01)的表达均低于RSV感染组；白藜芦醇50μmol/L组均能显著下调IL-6(P<0.01)和IL-8(P<0.05)的高表达,25μmol/L组IL-6和IL-8的含量也有所降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论：1.金欣口服液能够减轻RSV感染的BALB/c小鼠肺部及全身炎症反应。2.金欣口服液及白藜芦醇均能够下调RSV感染的体内外模型中IL-6、IL-8、IL-1p的高表达,并将其调控在接近于正常范围,由此推测两者可能为拮抗RSV感染的作用机制之一。