物理化学方法降解处理木质素条件要求严苛,并且污染严重。传统的真菌降解木质素的选择性差,容易造成苯环的开裂,并且降解产物处于解聚和重新聚合之间的动态平衡。木质素单体连接键中含量最多的是β-O-4键,研究β-O-4键的选择性降解对有效获取木质素单体非常关键。本研究主要通过以酿酒酵母为底盘表达来源于鞘氨醇单胞杆菌的木质素β醚解酶,以愈创木酚基甘油β愈创木基醚（GGE）为模拟底物,研究选择性可控断裂木质素β-O-4键。通过胞内表达木质素β醚解酶,研究了辅因子对β-O-4底物降解的影响,同时对β醚作用条件进行优化,结果表明辅因子对二聚体有较显著的影响和酶作用的条件最优是50℃、pH为9.0、缓冲液Tris-HCl和Cu²⁺。通过选用MFα信号肽和SED1信号肽将目标蛋白分泌细胞外,实现了培养上清液降解木质素模式底物二聚体。同时发现MFα信号肽介导的分泌降解34%二聚体强于SED1信号肽介导的降解28%二聚体。鉴于木质素β醚解酶由三个亚酶组成,研究分析将三个酶在一个细胞内分泌表达和分别在不同细胞内分泌表达的分泌效果,结果发现三个酶分别在三个细胞中分泌表达降解34%,效果优于同时在一个细胞内的分泌表达降解24%的效果。我们进一步研究了对分泌表达的三个酶的比例对降解效果的影响,发现三者的最优降解效果比例为ligD:ligF:ligG=2:1:5,实现27%的降解。我们研究了不同启动子,如PGK1p,TDH3p和Gal1p等对蛋白分泌的影响,发现Gal1p启动子作用下的酶分泌降解二聚体效果最优,达到0.376μmol,提升了34%。通过选用不同的温度和培养基对酿酒酵母培养条件进行优化以增强目标酶的产量和活性,结果表明温度为30℃,培养基为YPD时降解效果最优。