林蛙卵粕中混合氨基酸的制备工艺研究

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东北林蛙(Rana chensinensis)亦被称为哈士蟆,其与蛤蟆和田鸡是完全不同的纯野生动物,广泛分布于我国东北地区,是集药、食、补于一体的珍贵经济蛙种。林蛙卵中蛋白含量较为丰富,含有人体营养所需的8种必需氨基酸,具有较高的营养价值。并且富含微量元素,是一种天然、优质保健食品原料,但其开发利用目前甚少。本实验采用CO2超临界萃取提取过后的林蛙卵粕作为原料,对其进行了混合氨基酸的制备,增加了林蛙卵的利用率。本文对林蛙卵粕主要组分含量进行检测分析;分别采用超声波辅助溶剂提取法,酸水解法和酶水解法提取混合氨基酸,确定其最佳提取条件,从而确定最佳提取方法;利用732型阳离子交换树脂对混合氨基酸溶液进行纯化;通过氨基酸直接分析仪对混合氨基酸进行了检测分析。主要研究内容与研究结果如下:1、根据国家标准检测方法,对林蛙卵粕的主要组成成分含量进行了检测分析。结果如下:水分6.7%、灰分2.7%、粗脂肪1.42%、总糖0.65%、蛋白质46.94%、总酸0.46%。2、超声波辅助溶剂提取法,最佳提取条件为提取剂60%乙醇,料液比1:22.5,提取时间3h,提取温度80℃,提取率5.2%;酸水解提取法,最佳提取条件为料液比1:25,提取时间7h,提取剂6mol/L盐酸,提取温度100℃,提取率12.59%;酶水解提取法,最佳工艺条件为底物浓度4%,酶用量2000U/g,提取时间2h,提取温度60℃,提取率10.18%。3、利用732型阳离子交换树脂对混合氨基酸溶液进行纯化,实验表明:上样浓度3mg/mL,上柱流速3BV/h,吸附6h,用3%的氨水洗脱,洗脱后氨基酸的纯度可达90%以上。4、通过HPLC对纯化后的混合氨基酸进行检测分析。本论文的研究表明:酶水解提取法和732型阳离子交换树脂纯化技术,可以对混合氨基酸进行很好地提取及纯化,此项工艺可用于企业的大规模生产,对林蛙卵合理利用开发具有重要意义。
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