【摘 要】
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具有纯合基因型的植物材料是进行遗传和基因组研究的理想选择。但是,由于多年生木本植物生长周期长、遗传背景高度杂合、近交衰退等原因,利用常规育种技术难以获得纯合的株系
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具有纯合基因型的植物材料是进行遗传和基因组研究的理想选择。但是,由于多年生木本植物生长周期长、遗传背景高度杂合、近交衰退等原因,利用常规育种技术难以获得纯合的株系。以往研究报道显示体外单性生殖途径是获得单倍体以及双单倍体的重要应用。本研究以北京杨(Populus xbeijingensis)为试验材料,通过对小孢子细胞处于单核靠边期的花药进行离体培养,成功地获得了北京杨的单倍体株系。为了探索基本培养基和植物生长调节物质在愈伤组织诱导过程中的作用,选用三种基本培养基,两种不同的植物生长素即α-萘乙酸(Naphthalene acetic acid, NAA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-Dichloro-phenoxyacetic acid,2,4-D)以及两种不同的细胞分裂素即激动素(Kinetin, KT)和6-苄基腺嘌呤(6-Benzyladenine, BA)。结果显示添加了1.0mg／LNAA and1.0mg/L KT的H培养基中的愈伤组织的诱导率最高。将愈伤组织转接到添加1.0mg/L BA和0.2mg/L NAA的MS不定芽分化培养基,随后将不定芽转到添加不同浓度吲哚丁酸(Indole-3-butyric acid, IBA)(0.2-0.5mg/L)的1／2MS生根培养基中,不定芽成功生根。结果显示在含有BA (0.6mg/L)-NAA (0.2mg/L)的培养基中添加赤霉素(Gibberellic acid, GA3)(0.02-0.2mg/L)有助于不定芽的分化和节间的发育。运用流式细胞仪和染色体计数方法对580株再生植株进行倍性检测,确定单倍体植株为60株,比例为10.3%；三倍体植株为6株,比例为1.03%；其余的为二倍体植株。
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