酚类化合物3,4,5-三羟基-N-对酪醇基苯酰胺的抗癌活性和抗氧化活性的研究

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3,4,5-三羟基-N-对酪醇基苯酰胺(THTEB)是酪醇的一个衍生物,其结构是通过酰胺键连接没食子酸与酪醇两个基团。在本文的研究中,THTEB表现出强烈的抗人宫颈癌HeLa细胞增殖的活性。细胞周期分子显示THTEB可阻滞HeLa细胞周期停留在S期,并伴随着细胞G0/G1以及G2/M期活性的降低。[3H]胸腺嘧啶掺入法实验结果显示,THTEB可抑制DNA复制,这表明DNA合成的阻滞可能是THTEB阻滞细胞增殖的直接原因。然而,THTEB对RPA的ssDNA结合活性和拓扑异构酶Ⅰ介导的DNA松弛活性没有影响,这说明RPA和拓扑异构酶Ⅰ不是THTEB对DNA复制抑制的靶点。此外,通过碱性单细胞凝胶电泳(彗星实验),我们发现了THTEB可导致的严重DNA损伤。在肿瘤发生的所有诱因中,活性氧对DNA以及其它分子量分子的的损伤被认为是疾病发生发展的主要因素。在开发抗肿瘤药物的过程中,通常也检测目标化合物的抗氧化活性以研究这两种活性的内在联系。我们通过1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH),Trolox当量抗氧化能力(TEAC),清除超氧自由基能力测定,脂质过氧化法以及羟基自由基诱导DNA损伤的方法评价了THTEB的抗氧化活性。上述五种方法检测结果均显示,THTEB具有很强的清除自由基的活性。其中,THTEB对稳定自由基DPPH以及超氧自由基的清除活性超过抗坏血酸的相应活性,其IC50值分别为22.8μM,2.5μM。用TEAC方法测定THTEB总的抗氧化能力大约为0.6,也比维生素C相应值高。脂质过氧化法测定的THTEB活性要弱于著名的抗氧化化合物2,6-二叔基对甲苯酚(BHT)。此外,非常小浓度比如4μM的THTEB也对羟基自由基导致的pBR322 DNA链断裂具有显著的保护作用。总之,THTEB作为一种自由基清除剂具有很强的抗氧化活性,可以诱导细胞周期阻滞在S期,同时伴随着DNA损伤和DNA复制抑制。但是THTEB的作用靶点仍然不明。我们认为THTEB作为一种新的抗肿瘤治疗药物是有价值的。
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