论文部分内容阅读
目的：观察芝麻素（Sesamin）协同长春瑞滨（Vinorelbine）作用于人肺腺癌A-549细胞株的影响,为以后的临床应用奠定了一些理论及实验依据,特别是为以后非小细胞肺癌的化疗提供了一些新的思路。方法：实验细胞选择人肺腺癌A-549细胞株,并在体外进行培养。采用MTT比色法测定芝麻素、长春瑞滨、芝麻素协同长春瑞滨对人肺腺癌A-549细胞株的抗增殖作用；应用倒置显微镜、HE染色、Hoechst33258染色荧光显微镜等方法观察芝麻素、长春瑞滨、芝麻素协同长春瑞滨对人肺腺癌A-549细胞株的细胞凋亡形态学变化；通过流式细胞仪检测芝麻素、长春瑞滨、芝麻素协同长春瑞滨应用于人肺腺癌A-549细胞株后细胞凋亡情况以及细胞周期的影响；应用酶标仪检测对照组及各实验组（芝麻素组、长春瑞滨组、芝麻素协同长春瑞滨组）的caspase-3的活性变化。结果：①MTT比色法检测结果表明：芝麻素在浓度为10μg/ml～100μg/ml的范围内作用于人肺腺癌A-549细胞株48小时后,发现低浓度的芝麻素具有一定的抑制人肺腺癌A-549细胞株增殖的作用,长春瑞滨在浓度为5μg/ml～35μg/ml的范围内作用于人肺腺癌A-549细胞株48小时后,发现它具有抑制人肺腺癌A-549细胞株增殖的作用,且随着药物的浓度增加使细胞的抑制率也随之增高,芝麻素协同长春瑞滨联合使用对人肺腺癌A-549细胞株的生长抑制率高于两个单药使用（P<0.01）；②倒置显微镜、HE染色法、Hoechst33258荧光染色观察细胞形态学,发现用芝麻素组（S40μg/ml）、长春瑞滨组（N20μg/ml）和联合用药组S40μg/ml+N20μg/ml)作用于人肺腺癌A-549细胞株48小时后均比对照组贴壁细胞数量明显减少,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱,部分人肺腺癌A-549细胞贴壁不牢固、体积变小、变圆或变不规则形,核染色质凝集,细胞膜起泡形成凋亡小体,失去原有肿瘤细胞多角形或梭形形态,并且可看出联合组比单药组更加明显；③流式细胞仪检测人肺腺癌A-549细胞株早期凋亡率结果显示,药物作用48小时后,芝麻素组（S40μg/ml）μ长春瑞滨组（N20μg/ml）和联合用药组（S40μg/ml+N20μg/ml）均比对照组早期凋亡率高,并且联合用药组的早期凋亡率明显的高于单药使用的芝麻素组及长春瑞滨组；④芝麻素浓度在ICso（40μg/ml）处理人肺腺癌A-549细胞株48h后,Go/G1期细胞百分比下降,S期细胞百分比上升,阻滞周期于S期。长春瑞滨浓度在IC50（20μg/ml）处理人肺腺癌A-549细胞株48h后,Go/G1期细胞百分比下降,G2/M期细胞百分比上升,阻滞周期于G2/M期。芝麻素与长春瑞滨联合应用于人肺腺癌A-549细胞株48h后,G0/G1期细胞百分比下降,S期和G2/M期细胞百分比均上升,但S期更为明显,故主要阻滞周期于S期。⑤芝麻素与长春瑞滨联合作用人肺腺癌A-549细胞株后caspase-3的活性程度较单一用药明显提高。结论：1.低浓度的芝麻素具有一定的抑制人肺腺癌A-549细胞株增殖的作用；2.芝麻素协同长春瑞滨联合作用于人肺腺癌A-549细胞株具有显著的抑制作用和协同抗恶性肿瘤细胞作用；3.从形态学角度分析,芝麻素及长春瑞滨均对人肺腺癌A-549细胞株有诱导作用,且联合用药更为显著；4.芝麻素与长春瑞滨对人肺腺癌A-549细胞的抑制具有协同作用,与单药使用长春瑞滨相比,联合使用可减少长春瑞滨的用药剂量；5.芝麻素联合长春瑞滨主要抑制细胞周期S期,发挥抗肿瘤作用；6.芝麻素协同长春瑞滨作用人肺癌A-549细胞株后可促进caspase-3的活化。