【摘 要】
：
葡萄是世界性重要经济果树。欧亚种葡萄具有优良的商品价值,在世界范围内被广泛种植,但其抗病性差,易遭受白粉病等病害的侵害,对果实品质及产量造成严重的损失。化学防治虽具有见效快等优点,但也易使植物产生抗药性且污染环境。因此研究可用于抗病育种的抗病基因对解决葡萄病害问题具有重要意义。本研究依据前人抗病基因研究基础,选取了芪合酶基因STS6、STS29、泛素连接酶基因PUB23、PUB24和病程蛋白相关基
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目（编号:31872055）；
论文部分内容阅读
葡萄是世界性重要经济果树。欧亚种葡萄具有优良的商品价值,在世界范围内被广泛种植,但其抗病性差,易遭受白粉病等病害的侵害,对果实品质及产量造成严重的损失。化学防治虽具有见效快等优点,但也易使植物产生抗药性且污染环境。因此研究可用于抗病育种的抗病基因对解决葡萄病害问题具有重要意义。本研究依据前人抗病基因研究基础,选取了芪合酶基因STS6、STS29、泛素连接酶基因PUB23、PUB24和病程蛋白相关基因PR1、PR10.1六个抗病相关基因,设计引物,在人工接种白粉菌条件下,对抗病的中国野生毛葡萄丹凤-2和感病的欧亚种葡萄‘赤霞珠’通过实时荧光定量检测六个抗病相关基因的抗病性表达,从中筛选出中国野生毛葡萄丹凤-2基因VqPR1对白粉病的差异性表达,通过同源克隆VqPR1并研究其抗病功能。主要研究结果如下:1、同源克隆获得病程相关蛋白VqPR1基因,序列全长为483 bp,编码160个氨基酸,定位于3号染色体,等电点为8.04,为碱性氨基酸,含有PR1家族特征结构域;在自然条件下,对中国野生毛葡萄丹凤-2的不同组织表达分析,VqPR1基因在果实和花序器官中呈特异性高表达;通过PEG介导的方法将重组载体质粒转入拟南芥原生质体进行亚细胞定位分析,结果表明,VqPR1-GFP荧光在液泡区域成弥散状分布。2、通过酵母双杂交实验和BIFC实验验证了VqPR1与泛素连接酶Vq PUB24和胞泌复合体亚基Vq EXO70B1都存在相互作用。通过烟草瞬时表达系统进行VqPR1-GFP蛋白和自噬体标记物At ATG8f-m Cherry的共定位试验,结果表明Vq EXO70B1和VqPR1均能与自噬体共定位,并且VqPR1也能与液泡膜Marker共定位,表明VqPR1蛋白与Vq EXO70B1蛋白互作定位于自噬体膜上。通过互作初步验证了VqPR1可能是通过参与调控细胞内自噬这一重要的过程来发挥抗病功能。3、通过农杆菌介导的花序侵染法稳定转化拟南芥,并筛选获得VqPR1过量表达的拟南芥株系。人工接种白粉菌观察拟南芥叶片抗病表型,接种白粉菌7 d天后,野生型拟南芥叶片感病面积明显大于VqPR1过表达株系。台盼蓝染色观察发现,过表达拟南芥株系菌丝发育进程较慢,并且过表达拟南芥株系能够积累更多的胼胝质抵御病原菌的侵害。以上结果说明,过量表达VqPR1基因能够增强拟南芥叶片对白粉菌的抗性。通过荧光实时定量PCR分析SA途径相关基因和活性氧生成基因的表达量,VqPR1基因过量表达显著下调上述相关基因的表达,并且在抗白粉菌过程中响应幅度较低,表明VqPR1过量表达能负调控SA信号途径和活性氧的积累,这种负调控机制可能是为了抑制持续的免疫反应对植物造成伤害。
其他文献
目的 探析小儿肺炎疾病治疗方案中，盐酸氨溴索+盐酸丙卡特罗联合治疗方案的应用价值。方法 方便选择该院2021年1—8月收治的小儿肺炎患儿62例，基于治疗方案分组，对照组31例常规治疗，治疗组31例行联合治疗，分析两组疗效、症状缓解、肺功能指标及血气指标。结果 治疗组疗效96.77%高于对照组，差异有统计学意义（χ~2=4.679,P=0.030）；对照组咳嗽消失时间、啰音消失时间、喘息消失时间、胸
RNA编辑（RNA editing）是指转录后的mRNA发生碱基插入、缺失或替换,使转录产物不能忠实地反映模板DNA序列的过程。RNA编辑通过改变遗传密码增加蛋白质的多样性,影响前体mRNA的剪切、转录本的翻译和非编码RNA的加工以及microRNA与mRNA的结合。RNA编辑位点在人、小鼠、果蝇等物种普遍存在,同时发现机体处于疾病、病毒感染情况下会影响RNA编辑的改变。猪繁殖与呼吸综合征（Por
番茄（Solanum lycopersicum L.）是我国种植范围广、设施栽培面积大的主要蔬菜作物之一。由于番茄的喜温特性,我国设施生产中冬季的严寒和春季的倒春寒等常使其遭受亚低温胁迫,严重影响其正常生长发育,降低产量和品质。研究表明外源5-氨基乙酰丙酸（ALA）可以增强番茄对亚低温的耐性,但其对低温下植物元素吸收利用影响及其具体机制有待深入研究。因此,本文以低温敏感型番茄‘金棚一号’为材料,研
目的 分析小儿支原体肺炎喘嗽湿热阻肺证应用三仁苇茎汤治疗的效果。方法 选取2021年4月—2022年5月我院治疗的200例小儿支原体肺炎喘嗽湿热阻肺证患儿,采用随机数字表法将患儿分为观察组和对照组,每组均100例,对照组患儿单纯采用阿奇霉素治疗,观察组患儿在对照组的基础上加用三仁苇茎汤治疗,对比两组患儿的疗效、症状积分、不良反应等指标进行分析。结果 组间整体疗效对比显示,观察组患儿疗效比对照组更优
搅拌致热技术是利用搅拌转子叶片对液体工质进行机械搅拌,通过工质与叶片、容器壁的碰撞摩擦以及液体工质内部分子间相互作用将机械能直接转化为热能。相较于利用化石燃料进行致热的方式,该技术不仅致热效率高,同时清洁、环保。而热量易于储存使得该技术适合在分布式能源利用和离网应用等情景下使用,综合我国的风力资源分布情况,该技术在西北地区温室农业中有极高的应用潜力。目前对搅拌加热装置设计方法的研究还十分有限,它的
在设施农业生产中,温度、灌溉量、施肥频率均可以得到较精准的控制,同时,三者之间存在着复杂的相互作用。在不同温度下科学合理地灌水和施肥能够促进作物生长和产量品质的提升,并在一定程度上减少水资源与肥料的浪费。但目前尚缺乏在设施不同温度条件下通过调整灌溉量和施肥频率使作物达到优质高产的相关研究。为明确不同温度条件下,适宜设施黄瓜综合生长的灌水量和施肥频率,本研究以‘博耐526’黄瓜品种为试材,以温度、灌
豆科植物与根瘤菌共生固氮是一个高效的过程,也是取代工业氮肥的一种有效方式,对农业生产与生态环境具有重要意义。然而根瘤菌具有宿主专一性,不能与非豆科植物进行共生作用。但随着研究的不断深入,豆科植物与根瘤菌共生机制的神秘面纱也被一层一层揭开,通过基因和遗传工程手段让非豆科植物与根瘤菌共生体系的构建成为可能。本研究将百脉根根瘤菌共生信号通路中的10个关键共生基因通过根癌农杆菌介导的花序侵染导入拟南芥中,
番茄是设施栽培的主要蔬菜作物之一,随着我国设施农业的快速发展,番茄基质栽培面积也不断增加。调整滴灌施肥制度是提高蔬菜品质和产量的重要农业管理方式,在基质栽培中,滴灌营养液是肥料供给的主要的方式,但目前缺少基质袋培短茬口番茄的科学的营养液管理策略。因此,本研究在2020和2021年,以‘禾盛菲龙’番茄为试验材料,设计了两个试验,每个试验种植2茬,从滴灌频率、时间、滴灌量、以及营养液供应方式四个方面确
苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）是一种在形成芽胞的同时能够产生伴胞晶体蛋白（parasporal crystal protein,简称Cry蛋白）的革兰氏阳性细菌,对多种昆虫和线虫具有较强的毒杀活性。Bt制剂是世界上开发最早、产量最大、应用最广泛的生物杀虫剂。Bt发挥杀虫作用主要依赖Cry蛋白的活性,但作为一种重要的昆虫和线虫病原菌,Bt也可以产生多种其他致病因
猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）是一种以母猪的繁殖障碍和仔猪的呼吸道疾病为典型特征的免疫抑制性疾病,其病原体是猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）。PRRSV是单股正链RNA病毒,基因组变异速度快,传统疫苗