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目的:通过分析三类抗菌药物(消毒剂、抗生素和抗菌中药)介导金黄色葡萄球菌产生交叉耐药,揭示这三类抗菌药物与细菌耐药性之间的内在联系,并深入研究抗菌中药引起细菌对抗生素产生交叉耐药的机制,为指导新型抗菌试剂与抗菌中药复方的研发提供理论依据。这对规范我国抗菌药物尤其是抗菌中药的临床用药有重要意义,也对中药的长远发展起到扬长避短的作用。方法:1.根据抗性分析结果,选择亚致死剂量的氯己定(Chlohexidine diacetate,CHX)、四环素(Tetracycline,TET)、黄连水提液(Rhizoma coptidis extract,RCE)和三种中成药(葛根芩连丸(GGQL)、香连丸(XLW)和双黄连口服液(SHL))连续诱导细菌12天,通过最低抑菌浓度(MIC)检测细菌药敏变化,分析交叉耐药情况,实验平行诱导细菌3次。取诱导后的菌株进行回复突变,分析MIC的变化情况。通过药物接触菌株和回复突变菌株的抗性分析,与各自初始菌株的MIC值比较,发生交叉耐药的菌株,标记为变异菌株。2.分析变异菌株的生理生化特征变化,并通过16S r DNA的PCR扩增后,在Blast网站分析比对变异菌株的种属变异情况。通过分析变异菌株对阿米卡星(Amikacin,AMK)的耐药基因,设计引物PCR扩增耐药基因,通过凝胶电泳分析耐药基因的表达情况。结果:1.CHX诱导后,细菌降低了对RCE的敏感性同时提高了对TET、庆大霉素(Gentamicin,GEN)、AMK和头孢吡肟(Cefepime,FEP)的抗性。细菌对RCE的MIC提高了4-16倍,对TET的MIC提高了8-512倍,对FEP的MIC提高了4-16倍。在菌株SA hzj和SA ljb观察到对GEN和AMK产生交叉耐药(MIC升高16-512倍)。2.经TET诱导后,细菌对RCE和CHX的敏感性降低,对其他各类抗生素产生了交叉耐药(MIC升高了4-256倍)。但诱导后降低了对AMK的抗性(MIC降低了8倍)。3.经抗菌中药诱导后,细菌偏好于对TET、AMK、FEP产生了交叉耐药(MIC升高4-64倍)。但抗菌中药也能升高细菌对AMK的敏感性(MIC降低了4-8倍)。抗菌中药不偏好介导细菌对环丙沙星(Ciprofloxacin,CIP)、GEN和美罗培南(meropenem,MEM)产生交叉耐药。4.对AMK产生交叉耐药的机制研究发现,出现耐药基因aac(6`)/aph(2`)表达的菌株有:SA hzj、RCE诱导的SA hzj、SA ljb和RCE诱导的SA ljb。出现了aph(3`)-IIIa基因的菌株有:经RCE诱导的SA hzj、SA ljb及经RCE诱导的SA ljb。出现了ant(4`)-Ia基因的菌株有:SA hzj、经RCE第三次诱导的SA hzj、SA ljb及经RCE诱导的SA ljb。而ATCC25923诱导前后均未检出这三个耐药基因。结论:1.亚致死剂量的消毒剂、抗生素和抗菌中药都能介导细菌产生交叉耐药,结果暗示这三种抗菌药物的作用机制也许有某些程度的相同或相似。同时抗菌中药还能升高细菌对消毒剂和抗生素的敏感性。2.在中药引起细菌产生交叉耐药上,不仅单味黄连或多味含黄连或多味不含黄连的中成药都能引起细菌产生交叉耐药。3.细菌耐药性的出现似乎并没有必然的规律性,而是存在一定的随机性。4.抗菌中药介导细菌产生的这种耐药性存在偏好性,即抗菌中药可介导细菌产生交叉耐药,相对容易对TET、AMK、FEP产生交叉耐药,不易引起对CIP、GEN和MEM的交叉耐药。5.经RCE诱导的对AMK产生交叉耐药的细菌被检测出aac(6`)/aph(2`)、aph(3`)-IIIa和ant(4`)-Ia基因,且在RCE诱导后,aac(6`)/aph(2`)和ant(4`)-Ia基因出现了超表达。