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研究背景肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltratinglymphocyte,TIL)是对自体肿瘤细胞具有特异性杀伤效应的一组细胞群,其杀瘤活性较LAK细胞强50-100倍;尽管其用于肿瘤治疗领域已有20多年的历史,但至今一直有新技术、新成果在不断报道。TIL经胸腔内注入治疗癌性胸腔积液的有效率较高。目前临床上癌性胸腔积液患者较多,自体TIL回输治疗癌性胸腔积液,一方面为癌性胸腔积液的治疗提供了一条安全、有效、无毒副作用的方法;另一方面也避免了患者自身资源的浪费,经济而又方便。
目的在传统模式的基础上建立TIL治疗癌性胸腔积液时的最佳路径。方法癌性胸腔积液中的TIL经作者实验室建立的贴壁法分离后,分别采用含有不同浓度IL-2的RPMI1640培养基或自体胸水上清进行培养,其中IL-2终浓度为6000∪.ml-1;或首剂6000∪.ml-1,以后换液时终浓度为1000∪.ml-1;或终浓度一直为1000∪.ml-1。比较这两种培养基及含有不同浓度IL-2的自体胸水上清对TIL的增殖速度、免疫表型和杀瘤活性的影响。结果贴壁法能够获得更多的TIL细胞;自体胸水上清作为培养基培养TIL,对TIL的增殖、表型及杀瘤活性的影响与RPMI1640培养基间无差异。应用自体胸水上清培养时,IL-2终浓度为6000∪.ml-1组,或首剂浓度为6000∪.ml-1,以后换液时终浓度为1000∪.ml-1组TIL均发生明显扩增,均明显快于IL-2终浓度一直为1000∪.ml-1组。对TIL的免疫表型及对自体肿瘤细胞杀伤活性的影响经组间比较无显著差异。
结论(1)贴壁法是分离TIL与肿瘤细胞的较好方法,(2)TIL可以在自体胸水上清中培养,(3)TIL培养时首剂IL-26000∪.ml-1有着非常重要的意义,它有助于TIL在培养的早期就发生明显的活化、扩增。本研究为自体TIL体外分离后仅作短期培养,然后回输胸腔,后续胸腔内注入适量的IL-2,使其进一步生长,发挥杀瘤效应,从而治疗癌性胸腔积液奠定了的理论基础。