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一、【背景】热疗是通过加热使肿瘤组织的温度达到40~44℃,引起肿瘤细胞生长受阻与死亡的一种治疗方式,热疗对细胞的杀伤作用取决于热疗的温度及热疗的时间。联合应用热疗与化疗是一种合理的综合治疗方案,热疗能促进药物进入肿瘤细胞;促进药物诱发的肿瘤细胞凋亡;肿瘤组织中心部位达到较高温度时的酸性环境易诱发肿瘤细胞凋亡。
【目的】本实验旨在国内外现有的研究基础上,探讨数种抗肿瘤药物联合热疗体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖的效果,以确定联合方案是否具有协同效应。
【方法】本实验使用MTT法测定单独或联合应用化疗药物羟基喜树碱或顺铂与热疗对人肝癌SMMC-7721细胞的体外增殖的抑制作用,使用流式细胞仪检测了不同方案对SMMC-7721细胞凋亡率的影响。
【结果】结果表明,联合应用热疗可以显著提高化疗药物顺铂或羟基喜树碱引起的细胞增殖抑制及细胞凋亡。以亚毒性剂量浓度的顺铂为例,对照组、化疗组、热疗组、热化疗组的细胞增殖抑制率分别为0%、20.77%、32.46%、62.76%;细胞倍增时间分别为40.54h、50.30h、106.85h、166.07h;细胞凋亡率分别为2.19%、10.56%、15.16%、34.32%。
【结论】联合应用热疗与化疗药物羟基喜树碱或顺铂,对SMMC-7721细胞体外增殖的抑制及诱导细胞凋亡的能力具有显著的协同作用。
二、【背景】肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体属于肿瘤坏死因子超家族,具有在体外或体内大量、快速诱导转化细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞凋亡的作用,而对大多数正常细胞无此作用。目
【目的】本实验旨在国内外现有的研究基础上探讨数种化疗药物:顺铂、羟基喜树碱、丝裂霉素、健择或热疗联合TRAIL体外抑制肝癌细胞增殖的效果,以确定联合方案是否具有协同效应。
【方法】本实验使用MTT法测定单独或联合应用TRAIL及化疗药物羟基喜树碱、顺铂、丝裂霉素、健择或热疗对人肝癌SMMC-7721细胞的体外增殖的抑制作用,使用流式细胞仪检测不同方案对SMMC-7721细胞凋亡率的影响。
【结果】TRAIL联合应用四种化疗药物均可以显著提高化疗药物引起的细胞增殖抑制及细胞凋亡。以亚毒性剂量浓度的顺铂为例,对照组、化疗组、TRAIL组、TRAIL联合化疗组的细胞增殖抑制率分别为0%、14.91%、17.92%、62.45%;细胞凋亡率分别为3.19%、11.38%、17.56%、55.16%。但TRAIL联合热疗并不表现出明显的协同作用。
【结论】联合应用TRAIL与化疗药物对SMMC-7721细胞体外增殖的抑制及诱导细胞凋亡具有显著的协同作用,联合应用TRAIL与热疗不表现出明显的协同作用。
三、【背景】检验体外培养细胞存活与增殖的方法很多,如同位素释放法、乳酸脱氢酶释放改良法、流式细胞分析法、比色法等。
【目的】本实验在比较AlamarBlue法与MTT法的基础上探讨AlamarBlue法用于测定细胞体外增殖及细胞毒实验的可行性。
【方法】本实验采用AlamarBlue法及MTT法分别测定人肝癌细胞株SMMC-7721的体外增殖以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体、顺铂、羟基喜树碱对该细胞株体外增殖的影响,比较两种方法。
【结果】使用AlamarBlue法接种人肝癌SMMC-7721细胞数在3.12×102~2×104/孔范围内时,细胞数与AlamarBlue还原率呈线性相关(r=0.9989),高、中、低三种细胞浓度组内差异分别为1.41%、3.88%、4.87%。使用MTT法接种人肝癌SMMC-7721细胞数在3.12×102~2×104/孔范围内时,细胞数与OD值呈线性相关(r=0.9981),高、中、低三种细胞浓度组内差异分别为1.44%、4.07%、8.27%。
【结论】AlamarBlue法是一种简便、敏感、安全、经济的方法,可用于体外测定细胞增殖及化疗或免疫制剂的细胞毒作用。