何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根，是一味传统的补益类中药，临床应用广泛。但是近年来国内外相继出现了关于何首乌导致肝损伤的临床报道，引起人们的高度关注。前期调研发现药材质量问题是其引发肝损伤的重要原因之一。然而何首乌现有的质量控制方法主要是基于指标性成分的含量测定，这些质控指标与安全性关联还不够紧密，尤其是还无法控制炮制减毒的过程，难以保障临床用药安全。因此，何首乌的质量控制方法和手段还有待拓展。本文从生物检定的角度，探索建立何首乌肝细胞毒价检测方法，以期更准确的表征药材整体的肝毒性。为从药材质量问题层面降低何首乌临床肝损害的发生提供方法学支持。本研究主要内容及结果如下：1.肝细胞毒价检测方法的研究：根据何首乌产生肝损伤作用的药理特征，以正常人肝细胞系（L02细胞）作为研究对象，以细胞抑制率作为检测指标。通过对照品，药材提取方法，检测方法及检测条件的筛选和优化：选定对乙酰氨基酚为对照品；50%的乙醇，10倍量溶剂，超声30min制备药材供试品；CCK-8法检测细胞抑制率，其条件为3.5×104个mL-1的细胞进行接种，药物孵育24h，5%的CCK-8反应60min后检测吸光度。细胞抑制率进行三次方的数据转化，采用量反应平行线（2·2）法计算样品毒价。2.基于肝细胞毒价的何首乌炮制减毒研究：10批不同产地的生首乌毒价均值为329U g^-1，毒价差异较小（RSD=8%）。而18种自制何首乌炮制品毒价检测结果显示，样品毒价均随着炮制时间的增加而降低，并且最终趋于稳定。同时还发现高压清蒸法炮制2个小时后，样品毒价降低到135U g^-1，并且已经基本稳定。与常压清蒸法和高压黑豆汁蒸法相比，高压清蒸法不仅对毒性的降低作用较为明显，同时效率也较高。3.市售药材及相关中成药的毒价检测：通过对2个临床已产生肝损害的制何首乌药材进行检测，结果显示2个样品的毒价均较高，其中1个接近生首乌的毒价，为297U g^-1，说明药材炮制的程度未达到减毒的要求。通过对8种市售的中成药的检测，结果显示白蚀丸及脑脉泰胶囊毒价较高，分别为239U g^-1及195U g^-1，其中白蚀丸每日用量较高，其临床产生肝损伤作用的风险较大。4.何首乌生物毒价限度的制订：以5个毒性达到稳定的高压清蒸法炮制品的毒价为依据，初步拟定制何首乌的毒价限度为130U g^-1，同时在现行《药典》质量控制的基础上提出一个基于生物检定法的质量标准建议（草案）。