【摘 要】
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牡丹花芽休眠的彻底解除是保证牡丹成花质量的重要条件之一。本文以牡丹花芽为材料,对休眠解除过程中三个时期的牡丹花芽进行转录组测序,从中筛选到一个ERF转录因子基因推测其可能在牡丹花芽休眠解除中具有重要作用。利用病毒诱导基因沉默技术对筛选到的基因功能进行初步验证,并克隆了基因,对该基因进行一系列的生物信息学、表达模式分析以及功能研究。主要研究结果如下:1.通过VIGS技术沉默PsERF11基因后,观察
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牡丹花芽休眠的彻底解除是保证牡丹成花质量的重要条件之一。本文以牡丹花芽为材料,对休眠解除过程中三个时期的牡丹花芽进行转录组测序,从中筛选到一个ERF转录因子基因推测其可能在牡丹花芽休眠解除中具有重要作用。利用病毒诱导基因沉默技术对筛选到的基因功能进行初步验证,并克隆了基因,对该基因进行一系列的生物信息学、表达模式分析以及功能研究。主要研究结果如下:1.通过VIGS技术沉默PsERF11基因后,观察发现牡丹生长速度明显减慢。在菌液侵染13d时,PsERF11基因沉默植株处于刚萌发状态,TRV空载对照植株茎干处于开始伸长状态;在菌液侵染24d时,PsERF11基因沉默植株茎干开始伸长叶片稍微展开状,TRV空载对照植株茎干较长且叶片已展开。结果表明,PsERF11基因沉默植株生长明显慢于TRV空载对照植株。2.VIGS技术沉默牡丹植株中,PsERF11基因表达含量低于TRV空载对照,PsGA3ox1a基因在PsERF11基因沉默植株达中的表达含量水平明显低于TRV空载对照,PsNCDE2和PsAAO基因在PsERF11基因沉默植株中的表达含量水平明显高于TRV空载对照。3.双荧光素酶试验表明,PsERF11基因能够促进ABA生物合成途径结构基因PsNCED2的启动子活性,对PsAAO、PsGA3ox1a启动子活性无抑制作用。4.从牡丹叶片中克隆出一个与牡丹花芽休眠解除相关的ERF转录因子基因全长,命名为PsERF11,完整CDS序列长度为369bp,共编码122个氨基酸,属于ERF转录因子,具有典型的ERF家族保守结构域以及功能结构域。
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