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目的：Nanos基因编码一种含锌指结构的RNA结合蛋白，可以与其起协同作用的Pumilio蛋白结合，在原始生殖细胞生存相关基因的转录调控中起到重要作用。Nanos蛋白在时间、空间上对基因转录翻译和mRNA定位的调控，是启动果蝇胚胎后极化发育过程的关键机制。Nanos基因在原始生殖细胞的迁移和分化过程中发挥重要的功能，并且在秀丽隐杆线虫、斑马鱼、家蚕、非洲蟾蜍和小鼠等测试动物的生长发育方面也起到必不可少的作用。由于Nanos基因与大多数物种生殖器官的发育密切相关，因此我们推测日本血吸虫Nanos基因编码的蛋白在其生殖器官的发育中也起一定的作用。 方法：首先，使用DNAMAN软件和NCBI中BLAST，进行Nanos蛋白的同源性分析，来确定日本血吸虫Nanos的分型；然后再通过原位杂交的方法，探究Nanos基因在日本血吸虫的定位情况；随后，用针对Nanos基因的siRNA转染感染后28天合抱的日本血吸虫，体外培养10天，期间每隔3天转染一次siRNA，共转染三次；使用TRIzol方法提取虫体总RNA和总蛋白，通过荧光定量PCR以及Western blot方法分析其在mRNA和蛋白水平的消减情况；Nanos基因干扰后，使用盐酸胭脂红染色虫体的方法，通过激光共聚焦扫描显微镜观察日本血吸虫生殖器官的形态改变；我们还使用普通光学显微镜观察Nanos基因的干扰对日本血吸虫虫卵数量的影响；最后，在Nanos基因消减后，通过荧光定量PCR方法检测可能与Nanos基因相互作用以及虫卵形成相关基因表达水平的变化。 结果：Nanos蛋白同源性分析结果显示，日本血吸虫Nanos1（SjNanos1）蛋白与曼氏血吸虫Nanos2蛋白同源性为43%，与曼氏血吸虫Nanos1蛋白同源性为25%。依据文献报道，曼氏血吸虫Nanos2主要表达在卵黄腺中，可能与生殖系统发育相关，故将SjNanos1基因作为本课题的研究对象；原位杂交的结果显示，SjNanos1基因主要表达在合抱后日本血吸虫雌虫和雄虫生殖器官中，而合抱前的日本血吸虫并未发现SjNanos1基因的表达；SjNanos1基因的siRNA干扰后，与空白组相比，SjNanos1的表达在mRNA和蛋白质水平均显著降低；激光共聚焦扫描显微镜的观察结果显示，SjNanos1基因消减后，在日本血吸虫雄虫中，睾丸轻微收缩，并且在睾丸的腹侧部分几乎没有观察到成熟的细长的精子；同时，在每个睾丸中都发现有明显的裂隙。对于血吸虫雌虫，其卵巢中成熟卵母细胞减少，不成熟卵母细胞增多，卵黄腺中成熟的卵黄细胞也明显减少并且卵黄细胞也明显萎缩；在SjNanos1基因消减后，通过普通光学显微镜进行虫卵计数，发现雌虫的产卵数量在第4、第7天和第10天时分别下降了大约41％、56％和71％，并且雌虫子宫中虫卵的数量也明显减少，培养10天下降了50%左右；此外，SjNanos1基因沉默也影响了与SjNanos1基因相互作用的以及虫卵形成相关基因的变化，如Pumilio，CNOT6L和Fs800基因。在SjNanos1基因干扰后第10天，Pumilio基因的表达量增加了3倍左右，CNOT6L基因的表达水平下降了约50％。更值得注意的是，Fs800基因在日本血吸虫中的表达减少约90％。 结论：通过干扰日本血吸虫SjNanos1基因的表达，血吸虫雌虫卵巢、卵黄腺和雄虫睾丸形态发生明显的变化，并且雌虫的产卵量也受到显著的影响，因此我们可以得出结论，SjNanos1基因在日本血吸虫生殖器官的发育以及虫卵的形成和产生中发挥重要的功能。