Neu5Gc合成关键酶抑制剂的筛选、作用效果与机制研究

来源 :贵州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:a394665234
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)是一种非人源性唾液酸,普遍存在于除人类以外的许多哺乳动物中,如马、狗的血清和大猩猩等动物体内。但人类食用富含Neu5Gc的食物如红肉等,体内富集产生异种自身抗原,进而刺激机体引起炎症,加快肿瘤和相关疾病的发生。因此,若在宰前,特别是侯宰环节找到合适的预处理方式来降低红肉中含量,将会对红肉供应生产链的安全性生产产生深远影响。因此,本文拟从动物宰前处理筛选有效降低Neu5Gc合成的酶抑制剂,并对其作用效果以及机制进行研究。(1)Neu5Gc合成关键酶抑制剂的体外筛选通过文献查阅,确定木犀草素、山奈酚、槲皮素作为实验试剂,进行大鼠原代颌下腺上皮细胞(RAT-iCELL-g009)、前列腺癌细胞(PC3)内吞抑制实验结果表明:木犀草素、山奈酚、槲皮素能抑制游离态Neu5Gc通过细胞胞饮或内吞作用进入细胞。与对照组相比,实验组大鼠原代颌下腺上皮细胞(RAT-iCELL-g009)中Neu5Gc含量分别减少35.77±2.75%、37.59±2.52%、29.77±2.9%;实验组前列腺癌细胞(PC3)中Neu5Gc含量分别降低34.98±2.74%、42.25±1.45%、42.21±0.66%。(2)抑制大白鼠体内Neu5Gc合成的研究在前期实验的基础上,探究大鼠活体中Neu5Gc合成的干预效果,分别选用木犀草素150mg/(kg·d)、山奈酚200 mg/(kg·d)、槲皮素200 mg/(kg·d)的浓度剂量对大鼠进行为期60 d的经口灌胃实验,之后对灌胃30 d、60 d的大鼠肌肉组织、肝脏、肾脏中的Neu5Gc进行高效液相色谱检测,结果表明:30 d时,与对照组比较,木犀草素、山奈酚、槲皮素对肌肉组织中Neu5Gc的合成抑制效果显著,最大抑制率为13.36±0.09%(P<0.05);对肾脏、肝脏中Neu5Gc合成的抑制作用不显著。60 d时,与对照组相比,木犀草素、山奈酚、槲皮素对肌肉组织中Neu5Gc的合成抑制效果减弱,对肾脏、肝脏中Neu5Gc含量的抑制作用增强,最大抑制率为:34.35±0.09%(P<0.05);故经抑制率计算及日常膳食综合评价,确定最佳灌胃时间为30 d。(3)大鼠体内Neu5Gc合成与抑制剂浓度的关系通过确定最佳灌胃时间,在前期筛选的浓度上下各增加两个浓度梯度进行为期30 d的灌胃实验,结果表明:与对照组比较,木犀草素对抑制大鼠肌肉组织、肝脏中Neu5Gc合成的最佳作用浓度为150 mg/(kg·d),抑制率分别为:13.48±1.83%、12.8±0.06%,对大鼠肾脏中Neu5Gc的合成会随着浓度的逐渐升高而增强;不同浓度的山奈酚对大鼠体内Neu5Gc的合成均有一定的抑制作用,且对肌肉组织中Neu5Gc的抑制存在量效关系;槲皮素对抑制大鼠肌肉组织、肝脏及肾脏中Neu5Gc合成的最佳浓度为200 mg/(kg·d),抑制率分别为:24.74±0.07%、14.79±0.09%、5.82±0.02%。(4)抑制Neu5Gc合成的唾液酸转移酶机制的分子模拟探究采用分子对接和分子动力学模拟方法探究相关抑制机制。分子对接二维相互作用图表明,木犀草素、山奈酚和槲皮素都有效占据了唾液酸转移酶特异性抑制剂5’胞苷单磷酸的活性位点。对复合物进行200 ns的动力学模拟表明唾液酸转移酶和木犀草素产生氢键作用的残基主要是:Glu305、Asn150,和山奈酚产生氢键作用的残基主要是His301和Gly298,和槲皮素产生氢键作用的残基主要是Gly293、Glu324、Thr272、Ser276。结合自由能分解表明范德华力、静电相互作用、氢键对抑制过程具有重要作用。
其他文献
农业是国家重要发展产业之一,是国民经济中不可或缺的一部分,而种业的发展更是对农业发展产生着重要影响。但是,中国种子市场化改革以来,品种“多、乱、杂”成为社会各界对种
21世纪初,牧区合作经济组织进入了蓬勃发展阶段,其中草业专业合作社在稳定发展畜牧业和增加牧民收入的政策驱动下兴起,并得到了迅速的发展。牧区合作经济组织在发展当中虽然
探讨高职国际贸易专业的课程整合及"四模块"实践模式,探寻人才培养比较优势.
为提升水利工程管理水平,强化内部控制,防范经营风险,实现经营目标及战略规划目标,我们必须推动全面预算管理的顺利实施。本文就全面预算管理在水利工程中的应用谈几点粗浅认
党的十八大明确提出了“新型城镇化”的概念,在中央经济工作会议上,又进一步把“加快城镇化建设速度”列为2013年度经济工作六大任务之一。而我国城镇化进程中,农村的土地产
在中国经济社会发展的整体框架中,在可以预见的未来,农业将长期具有最为重要的基础产业地位,农村将长期承担农业生产、农民生活、生态循环等基础功能,农民将长期是中国最为庞
为降低高硫煤中的硫分,利用碱对高硫煤进行化学脱硫,考察了碱的种类、NaOH质量浓度、反应温度、反应时间、预处理温度、煤样粒度等对脱硫效果的影响,并对脱硫机理作了初步分
集体林权改革是构成社会主义林地生产关系的重要部分,是一种综合性的制度改革,它明晰林地使用权和林木所有权,是一种我国农村土地家庭联产承包制度在林地生产关系的延伸和拓
目的:观察乙酰半胱氨酸治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者氧化应激指标及外周血细胞因子TNF-α、IL-8指标的影响。方法:选择我院门诊收治的COPD稳定期患者60例为研究对象
目的:腹部肿瘤开放手术创伤大、历时长、出血机会多、手术风险大,围术期麻醉管理至关重要,液体治疗是其中之一。液体治疗对于围术期重要器官良好灌注、减少术后并发症、缩短