蜡梅核心种质的构建及其无性繁殖技术研究

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蜡梅(Chimonanthus praecox)集观赏、食用、药用价值于一身,具有广阔的开发应用前景。蜡梅还是第三纪孑遗植物,已列入国家重点保护野生植物名录。川渝野生蜡梅是现代蜡梅的栽培起源地之一,在我国蜡梅资源占有独特地位,其遗传多样性十分丰富,然而随着人们的滥砍滥伐,野生种质资源不断遭到破坏或丧失,因此重视和开展蜡梅种质资源的收集和保存工作,同时进行无性繁殖技术的研究,有利于我国蜡梅种质资源的高效利用。本文首先通过对野生蜡梅的采集建立了种质资源圃,利用ISSR分子标记构建蜡梅的核心种质,并对难生根植物蜡梅的扦插、嫁接技术进行研究,旨在为蜡梅种质资源的保护、利用、开发以及育种提供参考。主要研究结果如下:1本研究通过对川渝野生蜡梅小苗和种子进行采集,从四川万源与重庆巫溪共采集到野生小苗446株、种子1762粒,建立了蜡梅种质资源圃,实现了对野生蜡梅的迁地保护。通过ISSR分子标记进行遗传多样性分析,证实了川渝野生蜡梅具有丰富的遗传多样性。2基于ISSR分子标记数据,进行多次聚类得到了占初始种质10%、15%、20%、25%、30%和35%的候选核心种质。通过对遗传多样性参数的比较,最终确定了按20%取样比例获得的候选核心种质作为川渝野生蜡梅核心种质。核心种质包含26份野生蜡梅资源,其多态性位点数和多态性位点百分率的保留率高达96.54%,观测等位基因数、有效等位基因数、Nei’s遗传多样性指数和Shannon’s信息指数的保留率分别为98.36%,101.9%,104.18%和103%。t检验表明核心种质的有效等位基因数、Nei’s遗传多样性指数和Shannon’s信息指数与原种质没有显著性差异,保留种质与核心种质也没有显著性差异,说明所构建的核心种质较保留种质能更好地代表初始种质的遗传多样性。3设计了含激素种类、激素浓度、浸泡时间、基质四个因素的L16(4~4)蜡梅扦插的正交试验,结果表明恰当的因素组合能显著提高蜡梅扦插的存活率、生根率、生根数、根长、发芽率和芽长。极差分析表明,基质是影响生根率、生根数、根长和芽长最重要的因素;激素浓度是影响存活率、发芽率和发芽数最重要的因素,若不考虑基质的影响,激素浓度是影响除发芽数外所有指标最重要的因素。相关分析表明,各变量间存在一定的相关关系。处理5的生根率最高,为62.22%,其因素组合为A2B1C2D3,这与极差分析得到的理论最佳因素水平组合(A3B1C2D3)仅在激素种类上不同,这种实际最佳处理组合与理论最佳处理组合恰有一点不同的现象也体现在生根数和芽长上,这在一定程度上说明了正交试验的可行性与本次实验设计上的成功。4通过连续两年的秋冬季蜡梅嫁接试验,结果表明在秋冬季,9月下旬更有利于蜡梅嫁接成活,随着时间的推移,蜡梅成活率逐渐降低。在秋冬季,接穗部位对蜡梅嫁接无明显的影响,多年生实生苗作砧木比一年生实生苗做砧木更有利于蜡梅嫁接。
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