约氏疟原虫蛋白磷酸酶6免疫血清的传播阻断效果分析

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目的:疟疾作为一种传染性寄生虫病,始终威胁着人类健康。早在2010年,我国提出到2020年实现全国消灭疟疾的宏伟目标。然而由于疟原虫耐药性增加等问题的出现,疟疾的治疗效力减低。为了解决这一问题,各国逐渐把抗疟重点放在阻断疟疾传播上。研究发现,由激酶和磷酸酶调控的可逆蛋白磷酸化控制着许多细胞过程。虽然已经报道了疟原虫激酶的基本功能,但大多数蛋白磷酸酶(PPS)在疟原虫发育过程中的作用尚不清楚。因此本文主要分析约氏疟原虫蛋白磷酸酶6(PyPPM6)是否具有传播阻断效果。方法:PCR扩增PyPPM6蛋白功能区(359-644 aa),克隆到pET32a(+)载体。IPTG诱导PyPPM6重组蛋白表达,免疫小鼠后收集抗-PyPPM6免疫血清。通过ELISA和Western Blot检测血清中抗体效价及特异性。实验观察免疫血清对配子体出丝、动合子形成及转化率、囊合子形成的影响。结果:1、成功表达了PyPPM6重组蛋白。2、抗-PyPPM6免疫血清抗体滴度为1:64,000。3、与对照组相比,抗-PyPPM6免疫血清可使配子体出丝减少78.8%,动合子减少78.7%,动合子转化率降低55.1%,蚊胃内卵囊减少40.4%。结论:1、PyPPM6蛋白具有较强的免疫原性。2、抗-PyPPM6免疫血清具有良好的传播阻断效果。
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