九节龙皂甙抗癌活性及其作用机理的实验研究

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川产九节龙(Ardisea pusilla.PC)系紫金牛科紫金牛属植物的全草,九节龙皂甙Ⅰ(Ardipusilloside I)是从该全草中分离出的有效成分(单体),其分子式为C53H86O222H2O,经初步药理试验表明具有提高免疫功能的作用。有关其抗癌作用的基础研究,文献检索未见报道,故本实验研究九节龙皂甙对体外培养的人癌细胞的抑制作用,并探讨其抗癌作用机理。以肝癌(SMMC-7721、HCC-9204),胃癌(SGC-7901)、卵巢癌(HO-8910)、宫颈癌(Hela)、肺癌(A549)、食管癌(Eca-109)、肾癌(GRC-1)作为靶细胞,用MTT法观察九节龙皂甙Ⅰ对8株人癌细胞的抑制作用;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳分析九节龙皂甙Ⅰ作用后肿瘤细胞增殖周期的变化及肿瘤细胞DNA的梯形图谱;应用特异性Ca2+荧光探测剂Fluo-3/AM在LSCM条 件下检测不同时期细胞内Ca2+分布情况;采用免疫组化技术,检测Hela细胞发生凋亡的同时,检测信号转导分子的表达。结果表明:九节龙皂甙Ⅰ对8株人癌细胞皆有直接杀伤作用,使Hela细胞阻滞与G2期,且诱导Hela细胞凋亡发生;凋亡时细胞内[Ca2+]增加且维持在较高水平;同时伴发信号转导分子表达水平的增高。结论:九节龙皂甙Ⅰ的抗癌机理表现在剂量≥ 第四军医大学颀土学位论文 12.sing/L时,通过细胞毒作用直接杀伤肿瘤细胞;在剂量为 6.3瞰时,对Hela细胞进一步研究表明细胞内Cd”浓度的增加, 是导致Hela细胞凋亡及信号转导分子表达水平增高的重要因素。
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