【摘 要】
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目的:眼底新生血管(Neovascularization,NV)形成是一个复杂的病理过程,是多种细胞如视网膜色素上皮细胞、胶质细胞和内皮细胞与促血管生成相关因子、炎症因子等相互作用的结
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目的:眼底新生血管(Neovascularization,NV)形成是一个复杂的病理过程,是多种细胞如视网膜色素上皮细胞、胶质细胞和内皮细胞与促血管生成相关因子、炎症因子等相互作用的结果。内皮细胞特异性生长因子1(Endothelial Cell Specific Molecule-1,Endocan)被证实在缺氧视网膜中的表达水平显著升高。本课题拟探讨endocan在三种实验性眼底新生血管动物模型中的作用和潜在机制。方法:1.在动物实验中,应用real-time RT-PCR和western blot检测缺氧诱导视网膜病变模型(Oxygen-induced Retinopathy,OIR)、激光光凝诱导脉络膜新生血管模型(Laser-induced Choroidal Neovascularization,CNV)及rho/VEGF(Rhodopsin/VEGF,Rho/VEGF)转基因模型小鼠视网膜或脉络膜组织中endocan的表达水平;对上述小鼠模型进行玻璃体腔内注射endocan中和抗体后,应用视网膜、脉络膜免疫荧光染色铺片方法及分子生物学方法评估眼底NV形成的情况;2.体外试验中,应用Matrigel检测endocan重组蛋白干预后人视网膜血管内皮细胞(Human Retinal Microvascular Endothelial Cell,HREC)的管形成情况,并应用real-time RT-PCR和western blot进一步探讨endocan促NV生成的可能机制。结果:1.Endocan在三种眼底新生血管小鼠模型中mRNA和蛋白表达水平均升高;endocan在视网膜和脉络膜新生血管部位和血管内皮细胞共定位;玻璃体腔内注射endocan中和抗体后,视网膜、脉络膜以及视网膜下新生血管生成均被抑制;同时,促血管生成相关因子mRNA和蛋白的表达量均减少。2.体外给予人endocan重组蛋白干预后,能显著地促进HREC细胞管腔形成;endocan通过调节内皮细胞VEGF信号通路进而影响新生血管形成。结论:Endocan是临床上治疗视网膜和视网膜下NV性疾病的潜在靶点。
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