Micro RNA（miRNA）是一种单链RNA（single-strand RNA）分子,通常由19～25个核苷酸组成,其含有的特定种子序列（seed sequence）能识别一些基因转录形成的mRNA的3’端非翻译区（untranslated region,UTR）上的序列,进而参与调控基因的转录后表达,广泛参与了动植物的各项生理活动。本研究通过比对西农萨能奶山羊子宫内膜组织样本的miRNA高通量测序数据发现,miR-122在奶山羊子宫内膜容受状态的相对表达量与达到容受状态之前的相对表达量存在显著差异（P<0.01）。之后根据miR-122的种子序列在山羊的基因文库中寻找有互补序列的基因,推测FOXO3为miR-122的靶基因。研究显示miR-122在肝脏细胞的发育、分化以及应激等过程中发挥着重要作用,但目前尚无研究阐述其在奶山羊子宫内膜上皮细胞（endometrial epithelial cell,EEC）的调控机制。FOXO3（forkhead box O3,叉形头转录因子家族的O亚型,也可以表示为FOXO3a）蛋白的特点是鲜明的叉头DNA结合域,在细胞的增殖和分化过程中发挥重要作用。因此研究miR-122在奶山羊子宫内膜上皮细胞中对于FOXO3的靶向调控作用有助于阐明奶山羊子宫内膜相关生理活动的分子调控网络。本研究以西农萨能奶山羊的子宫内膜上皮细胞为研究对象,首先通过RT-qPCR技术检测子宫内膜上皮细胞中miR-122与FOXO3的表达量,然后构建野生型（WT）与突变型（MUT）pmirGLO-FOXO3-3’UTR载体,进行双荧光素酶检测从而确定miR-122与FOXO3的靶向关系,最后利用RT-qPCR、CCK8、EdU、Annexin V-APC/7-AAD细胞凋亡检测、Western blot等技术,研究miR-122以及FOXO3对奶山羊EEC的调控作用。本研究取得的主要结果如下:1.本研究首先构建了野生型pmirGLO-FOXO3-3’UTR-WT和突变型pmirGLO-FOXO3-3’UTR-MUT双荧光素酶载体,然后分别与miR-122 mimic、miR-122inhibitor、Negative control（NC）和Negative control inhibitor（NCH）共转染到HEK293T细胞中,检测其各自的海肾荧光值和萤火虫荧光值的强度。双荧光检测结果显示,与miR-122共转染的野生型试验组的荧光素酶活性显著低于NC组（P<0.01）,但在突变型试验组内无显著性影响,表明miR-122通过与FOXO3-3’UTR相互作用导致荧光素酶活性降低,这一结果初步表明FOXO3是miR-122的靶基因。2.将miR-122转染到EEC中,通过RT-qPCR和Western blot技术检测FOXO3在转录水平和蛋白水平上的表达,结果显示miR-122可以在转录水平和蛋白水平上抑制靶基因FOXO3的表达。3.在EEC中,Western blot试验结果表明miR-122能够促进RAS/ERK通路的活性,并在蛋白水平上调了BCL2/BAX的比值,同时通过CCK8、EdU和Annexin V-APC/7-AAD细胞凋亡检测技术检测表明miR-122能抑制EEC凋亡。4.将FOXO3过表达载体转染入EEC后,通过CCK8、EdU和Annexin V-APC/7-AAD细胞凋亡检测技术和Western blot分析发现FOXO3能够促进EEC凋亡。综上所述,本试验成功验证了在西农萨能奶山羊子宫内膜上皮细胞中miR-122可以通过靶向结合FOXO3,进而抑制FOXO3促进细胞凋亡的作用。