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目的卒中后抑郁(Post-stroke Depression,PSD)是指脑卒中后诱发的抑郁症状,是脑卒中后最常见的情感障碍疾病之一。PSD对脑卒中患者神经功能康复、生活质量和生存率有重要影响,明显加重患者本人、家庭及社会的经济负担,因而目前受到越来越多的关注[1]。但PSD发病机制并不十分清楚,课题组前期研究发现,海马结构的损伤与PSD的发生密切相关,“海马神经重塑障碍”是其关键步骤,因JAK/STAT信号通路广泛参与细胞的增殖、分化成熟、凋亡以及免疫调节等过程,且JAK2、STAT3在海马神经元和神经胶质细胞中均有表达,与神经退行性疾病关系密切,故本研究基于JAK2/STAT3信号通路对PSD大鼠行为学及海马进行了研究,以期发现JAK2/STAT3信号通路与PSD的相关性及颐脑解郁复方对PSD的干预机制。方法将270只雄性SPF级SD大鼠随机分为正常组、假手术组、卒中组、PSD组、西药组和中药组,每组各45只。假手术组只分离血管,卒中组仅行MCAO术、PSD组、西药组、中药组在MCAO术后1周应用慢性束缚应激复合单笼饲养的方法制备PSD大鼠模型。自脑卒中造模开始后7天,西药组给予盐酸氟西汀胶囊2.33mg/(kg·d)灌胃,中药组给予9.92g/(kg·d)灌胃,其余各组大鼠给予蒸馏水10mL/kg灌胃,均每日1次。分别于卒中后第2、4、8周进行下列检测:1.蔗糖水试验、旷场试验和强迫游泳实验检测其行为学变化。2.免疫组化法检测海马齿状回区P-JAK2,P-STAT3的表达。3.Western blot 法检测海马区 P-JAK2,P-STAT3 的表达。4.RT-PCR法检测左侧海马JAK2,STAT3基因的表达。1.行为学测试结果1.1蔗糖水偏好试验结果2、4、8周时,相比正常组,假手术组大鼠蔗糖水偏好度均无差异(P>0.05)。2周时,相比假手术组,卒中组大鼠蔗糖水偏好度明显下降(P<0.01);相比卒中组大鼠,PSD组大鼠蔗糖水偏好度无差异(P>0.05);相比PSD组,西药组大鼠蔗糖水偏好度明显升高(P<0.05);颐脑解郁复方组大鼠蔗糖水偏好度无差异(P>0.05)。4周时,相比假手术组,卒中组大鼠蔗糖水偏好度明显降低(P<0.05);相比卒中组大鼠,PSD组大鼠蔗糖水偏好度明显下降(P<0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组和西药组大鼠蔗糖水偏好度明显提高(P<0.01);8周时,卒中组大鼠相比假手术组、西药组和颐脑解郁复方组,蔗糖水偏好度均明显下降(P<0.01,P<0.05,P<0.05);相比卒中组大鼠,PSD组大鼠蔗糖水偏好度下降(P>0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组和西药组大鼠蔗糖水偏好度数值均明显升高(P<0.01)。2、4、8周时,西药组和颐脑解郁复方组大鼠蔗糖水偏好度均无差异(P>0.05)。1.2旷场试验结果2、4、8周时,相比正常组,假手术组大鼠旷场垂直和水平得分均无差异(P>0.05)。2周时,相比假手术组,卒中组大鼠垂直和水平得分均下降(P<0.01);相比卒中组大鼠,PSD组大鼠垂直和水平得分均下降(P<0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组和西药组大鼠垂直得分无差异(P>0.05),水平得分升高(P<0.01,P<0.05)。4周时,相比假手术组,卒中组大鼠垂直下降(P>0.05),水平得分下降(P<0.05);相比卒中组大鼠,PSD组大鼠垂直和水平得分明显下降(P<0.01,P<0.05);相比PS D组,颐脑解郁复方组和西药组大鼠垂直、水平得分明显升高(P<0.05;P<0.01)。8周时,相比假手术,卒中组大鼠垂直和水平得分均明显下降(P<0.01);相比卒中组大鼠,PSD组大鼠垂直和水平得分无差异(P>0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组和西药组大鼠垂直和水平得分均明显升高(P<0.01)。2、4、8周时,相比西药组,颐脑解郁复方组大鼠旷场垂直和水平得分均无差异(P>0.05)。1.3强迫游泳试验结果2、4、8周时,相比正常组,假手术组大鼠游泳挣扎时间均无差异(P>0.05)。2周时,相比假手术组,卒中组大鼠游泳挣扎时间无差异(P>0.05);相比卒中组,PSD组游泳挣扎时间明显缩短(P<0.01,P<0.05);相比PSD组,西药组大鼠游泳挣扎时间明显延长(P<0.05),颐脑解郁复方组大鼠游泳挣扎时间无差异(P>0.05)。4周时,相比假手术组,卒中组大鼠游泳挣扎时间游泳挣扎时间明显缩短(P<0.01);相比卒中组,PSD组大鼠游泳挣扎时间明显缩短(P<0.01);相比PSD组,颐脑解郁复方组和西组大鼠游泳挣扎时间明显延长(P<0.01);相比卒中组,颐脑解郁复方组大鼠游泳挣扎时间明显延长(P<0.05)。8周时,相比假手术,卒中组大鼠游泳挣扎时间明显缩短(P<0.01);相比卒中组大鼠,PSD组大鼠游泳挣扎时间无差异(P>0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组和西药组大鼠游泳挣扎时间明显延长(P<0.01,P<0.05);相比卒中组,颐脑解郁复方组大鼠游泳挣扎时间明显延长(P<0.05)。2、4、8周时,颐脑解郁复方组大鼠游泳挣扎时间相比西药组,均无差异(P>0.05)。2.1分子实验结果2.1 JAK2实验结果2、4、8周时,相比正常组,假手术组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均无差异(P>0.05)。2周时,相比假手术组,卒中组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均明显升高(P<0.05,P<0.05,P<0.01);相比卒中组,PSD组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均没有统计学差异(P>0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组和西药组JAK2免疫组化、WB 和 PCR 结果均降低(P<0.05,P>0.05,P>0.05)。4周时,相比假手术组,卒中组JAK2免疫组化、WB和PCR结果升高(P<0.05);相比卒中组,PSD组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均升高(P<0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01);西药组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均明显降低(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。8周时,相比假手术组,卒中组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均升高(P<0.05,P>0.05,P>0.05);相比卒中组,PSD组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均没有差异(P>0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均降低(P<0.05);西药组JAK2免疫组化、WB和PCR结果降低(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。2、4、8周时,相比西药组,中药组JAK2免疫组化、WB和PCR结果均无差异(P>0.05)。2.2 STAT3实验结果2、4、8周时,相比正常组,假手术组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均无差异(P>0.05)。2周时,相比假手术组,卒中组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均明显升高(P<0.05,P<0.05,P<0.01);相比卒中组,PSD组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均无差异(P>0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组和西药组STAT3免疫组化、WB和P CR 结果均降低(P<0.05,P>0.05,P>0.05)。4周时,相比假手术组,卒中组STAT3免疫组化、WB和PCR结果升高(P>0.05,P<0.05,P>0.05);相比卒中组,PSD组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均升高(P<0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01);西药组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。8周时,相比假手术组,卒中组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均升高(P<0.05,P>0.05,P>0.05);相比卒中组,PSD组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均没有统计学差异(P>0.05);相比PSD组,颐脑解郁复方组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均降低(P<0.05);西药组STAT3免疫组化、WB和PCR结果降低(P<0.05,P>0.05,P<0.05)。2、4、8周时,相比西药组,中药组STAT3免疫组化、WB和PCR结果均无差异(P>0.05)。结论线栓法MCAO术联合束缚应激和孤养的方法,可在术后4周建立稳定的PSD模型。颐脑解郁复方对PSD具有预防和治疗的双重作用。JAK2/STAT3信号通路的过度活化可能阻碍了大鼠海马神经重塑的进程,颐脑解郁复方的治疗作用可能与抑制JAK2/STAT3信号通路相关基因和蛋白的表达、促进海马神经重塑有关。