金属蛋白—含有金属的蛋白—生命过程都离不开金属蛋白，人体内的蛋白大约1/3是金属蛋白，它对生命活动的基本过程很重要，包括DNA合成、新陈代谢、消除毒素以及生命所需的碳、氧和氮的化学转化。许多疾病是由于金属失衡或关键金属酶失活引起的，金属蛋白的制备和性能研究是理解其生理功能的前提。针对转铁蛋白提取，超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD, EC1.15.1.1）的提取及性能和超氧化物歧化酶模拟酶的合成进行了研究，转铁蛋白是铁结合的血清糖蛋白，调控体液中游离铁水平，超氧化物歧化酶能将有害的超氧阴离子自由基歧化为无害的分子氧和双氧水。转铁蛋白和超氧化物歧化酶与越来越多的疾病相关联，包括炎症、癌症和糖尿病，因此它们在医药、营养和化妆行业有重要作用。转铁蛋白和超氧化物歧化酶从粗品通过两步纯化可获取纯品，第一步，热激法、硫酸铵沉淀法用于粗酶液的初步纯化。进一步纯化包括凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析。得到的主要结论如下：（1）鸭血清转铁蛋白经过两步纯化，热激和固定化金属螯合亲和层析，能获得光谱纯的鸭血清转铁蛋白。（2）南瓜瓤是制备超氧化物歧化酶的新的、廉价的和可再生的资源。测试药食两用蔬菜中超氧化物歧化酶的活性，发现有些蔬菜，如南瓜瓤、南瓜果肉、南瓜籽和大蒜SOD每克样品（干基）超氧化物歧化酶酶活都高于500IU，属于富含超氧化物歧化酶的药食两用植物。其中南瓜瓤和南瓜果肉都高于南瓜籽；南瓜瓤和南瓜果肉都高于大蒜；而南瓜瓤中超氧化物歧化酶酶活最高。南瓜瓤是生产南瓜粉、南瓜籽和南瓜籽油等的副产品，是提取超氧化物歧化酶的廉价资源。（3）建立了从南瓜瓤提取超氧化物歧化酶的简单而有成本效益的纯化方法。南瓜瓤用磷酸缓冲液浸提，经热激与硫酸铵沉淀耦合和亲和层析，能获得电泳纯的超氧化物歧化酶纯品，纯化倍数达到87，酶活收率为42%，比活为2884IU·mg-1蛋白。（4）南瓜瓤超氧化物歧化酶是首次发现源于植物的糖基化SOD。南瓜瓤超氧化物歧化酶是同型二聚体，由两条相同的亚基组成，用MicrOTOF-Q质谱仪测得亚基分子量为17477Da，用凝胶过滤层析测得超氧化物歧化酶分子量为35.0kDa。南瓜瓤超氧化物歧化酶是Cu,Zn-SOD，每条亚基含有约1个铜和1个锌，并且对H2O2敏感。南瓜瓤Cu,Zn-SOD是糖蛋白，其分子量较其他植物Cu,Zn-SOD的高，pH稳定性范围较其他植物Cu,Zn-SOD的宽。在25℃，2h，南瓜瓤Cu,Zn-SOD在pH4～12保持其活性，在pH7.8，45min，南瓜瓤Cu,Zn-SOD在低于50℃保持其活性。南瓜瓤Cu,Zn-SOD活性被SDS和NaN3轻微抑制，而Na3BO3和柠檬酸钠对其活性没有影响。由此，被当作废弃物的南瓜瓤，是提取Cu,Zn-SOD的优质原料，可被化妆、医药和营养行业商业开发。（5）合成了槲皮素铜及槲皮素锌配合物，然而，由于其低活性，它们不能作为超氧化物歧化酶模拟化合物，也许可以作为电荷调节剂。鸭血清转铁蛋白和南瓜瓤Cu,Zn-SOD被成功纯化，它们是金属结合的糖蛋白。