目的:　　染色体病是造成新生儿出生缺陷的重要原因之一，可以通过产前诊断来预防患儿出生，目前应用于临床产前诊断的检测技术主要是通过获取胎儿细胞进行染色体核型分析，样本包括绒毛、羊水、脐血。随着分子技术在遗传学领域中的应用，FISH、QF-PCR、DNA芯片等检测技术逐渐在临床开展，这些技术具有各自的检测优势又同时存在一定的局限性，传统的染色体检测技术在产前诊断中仍起着无可替代的作用。　　羊水染色体检测技术是目前临床开展产前诊断的主要检测手段，包括羊水细胞培养和染色体制备技术。由于羊水培养易污染，染色体制备技术操作繁琐等特点，在一定程度上限制了临床开展的羊水量。随着产前筛查的广泛开展以及二胎的政策开放，产前诊断需求量急剧增加，有限的羊水量与临床需求的矛盾日趋激烈，由此研究人员不断探索，目的是为了得到一个高成功率、高质量、高效率的技术方法，以满足临床需求。　　对羊水染色体检测技术的改良，本研究首先改进实验室羊水细胞培养操作,包括构建两个独立平行操作体系，修订无菌操作SOP及质控管理，同时建立了羊水细胞污染处理流程，确保羊水细胞成功培养和实验的有序进行。研究染色体的分散，为染色体制备技术改良实验提供稳定一致的最适染色体分散条件，在此基础上，重点建立了快速羊水染色体制备技术—微量高速离心法。微量高速离心法的建立是在保证染色体质量的前提下，创新采用高速离心制备，同时缩减整个操作体系至2mL微量离心管中，结合高浓度秋水仙素的应用，极大的提高了制备效率。通过与传统制备方法进行比对实验，评估微量高速离心法的制备质量，同时对临床产前诊断标本进行检测来探讨该改良方法在临床产前诊断中应用的可行性。　　方法:　　1、改进羊水细胞培养操作流程体系，构建两个独立平行的操作培养体系。制定严格的无菌操作程序（SOP）和质控管理，同时建立污染羊水的处理SOP。　　2、改良染色体制备-微量高速离心法的建立。　　2.1染色体分散的研究。染色体在不同的温度、相对湿度和滴片高度的组合条件下分散，分别测量核型面积。采用响应面回归方法对响应值进行统计学分析，分析T、RH和h与染色体分散的相关性，总结得到合适的分散条件。　　2.2高浓度秋水仙素的应用。取40例羊水标本，与传统方法进行比对实验，采用配对t检验对秋水仙素的作用效果包括染色体的质量和数量进行统计学分析，评估高浓度秋水仙素应用的可行性。　　2.3建立微量高速离心法的技术流程，取50例羊水标本，同时采用微量高速离心法和传统法制备染色体，分析两种方法的分裂指数、有效核型率及优秀核型比率等指标，采用配对t检验进行统计学分析来评估制备质量。建立微量高速离心法检测技术SOP。　　2.4随机选取50例产前诊断病例进行微量高速离心法的临床检测应用，分析染色体结果。　　结果:　　1、羊水细胞培养，2016年共计1650例羊水标本，污染11例（失败1例），建立污染羊水的处理SOP成功挽救10例污染羊水。改进羊水细胞培养操作流程体系及建立质控管理后，2017年共计1200例羊水标本，成功收获并报告结果1200例，培养成功率为100%。　　2、改良羊水染色体制备技术。　　2.1.经响应面回归分析得染色体分散影响因素温度（T）和相对湿度（RH）均对核型面积的影响极显著（P<0.01），滴片高度（h）对核型面积影响不显著。实验得温度T为25℃，湿度在RH48%～52%范围内均可得到分散可、丢失率少的染色体核型。　　2.2.配对t检验分析改良高浓度秋水仙素和传统方法比对实验结果，显示分裂指数P=0.993（P>0.05），认为在分裂相数量方面差异无统计学意义；有效核型率和优秀核型比率P=0.000（P<0.05），认为在染色体质量方两组之间差异有统计学意义，即改良高浓度法优于传统法。　　2.3.建立微量高速离心法SOP，采用配对t检验分析与传统染色体制备方法比对的实验结果，显示分裂指数P=0.446（P﹥0.05），认为差异无统计学意义，即微量高速离心法同样可以获得足够量的染色体数量。有效核型率和优秀核型率均为P=0.000（P﹤0.05），认为在染色体质量方面差异有统计学意义，微量高速离心法染色体的质量要明显优于传统法。　　2.4.应用于50例临床产前诊断标本，检出异常核型3例，与传统法制片核型符合率为100%。21三体1例、46,XX,del(5)(p13)1例、46,XX,r(21)[33]/45,XX,-21[17]1例。　　结论:　　改良羊水染色体检测技术，改进了羊水细胞培养流程体系，大大提高了羊水培养的成功率，保证了实验的有序进行。创新建立了快速羊水染色体制备技术—微量高速离心法，将整个操作时间缩短至原来的1/3，提高了染色体制备效率的同时在染色体质量有了明显提高，减少了有毒试剂的使用量，减少了对环境的污染。在临床产前诊断标本中应用显示较好的检测效果，有望应用于实际临床羊水产前诊断，来缓解临床需求的矛盾。