转移因子(transfer factor, TF)是从淋巴细胞中提取的一类小分子物质,化学本质是小肽与寡聚核苷酸复合物。TF能够将供体的细胞免疫功能转移给受体,尤其是非特异性TF能够提高受体天然免疫和特异性免疫功能的特性使其在人类和多种动物疾病防治中获得普遍应用。犬细小病毒病是由犬细小病毒感染引起的一种急性传染病,以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显著减少为主要特征,并可引起犬急性心肌炎。症状与猫泛白细胞减少症相似,是危害我国养犬业最为严重的传染病之一。前期试验中,猪、犬TF对犬细胞免疫的增强作用已得到证实。为了进一步研究猪、犬TF能否作为疫苗稀释剂,以期最终简化免疫方法和程序,本试验在细胞水平上对猪、犬TF对犬细小病毒体外增殖的影响进行了初步研究。从TF与疫苗联合使用和将TF作为疫苗稀释剂两个方面研究了猪、犬TF对犬体液免疫的影响。结果如下:1犬细小病毒的增殖与检测对实验室保存的犬细小病毒在MDCK上进行增殖,为后续试验提供抗原。用血凝实验检测犬细小病毒,并对检测条件进行了优化。50 mL,1 %醛化红细胞,以0.01 M PH6.8的PBS为稀释液,4℃反应60 min是检测犬细小病毒的最佳条件。疫苗进行稀释后,其血凝效价为26,按照增毒步骤进行操作后,细胞培养物的血凝效价为211,证明了疫苗中含有犬细小病毒弱毒。2不同剂量TF对犬细小病毒增殖的影响在培养的MDCK中,单独加入不同剂量的猪、犬TF,均可引起MDCK出现细胞病变。细胞病变出现的时间,随着TF剂量的减少而推迟。猪TF对MDCK的破坏作用大于同等剂量下犬TF对MDCK的破坏。细胞吸附病毒后,加入TF,细胞病变出现的时间,远早于TF或犬细小病毒单独作用于MDCK上的时间,说明二者的共同作用加速了细胞病变的产生。不同剂量的猪、犬TF均可使疫苗中所含的犬细小病毒在MDCK上的增殖减弱,剂量越少影响越小,同等剂量下猪TF对其的影响比犬TF的大。3猪、犬TF对犬体液免疫的影响3 mL猪、犬TF与疫苗联合使用,每隔五天采血,检测犬细小病毒抗体,抗体效价没有明显的改变。3 mL猪、犬TF作为疫苗的稀释剂对犬进行免疫,抗体效价也没有明显的差异。说明3 mL猪、犬TF不论与疫苗联用,还是作为疫苗的稀释剂,均对犬的体液免疫没有明显的影响。本研究对猪、犬TF对犬体液免疫的影响进行了研究,结果显示TF可以作为疫苗稀释剂使用,但对犬的体液免疫没有明显的影响,其剂量还需要进一步的研究。