骨肉瘤多发于青少年，致残和病死率高，预后差。随着测序技术和分子生物技术的发展，环状RNA成为肿瘤研究中的热点，作为潜在的肿瘤标志物，找到可用于骨肉瘤的诊断及治疗靶点的环状RNA临床意义重大。
　　目的：
　　通过高通量测序分析骨肉瘤组织的环状RNA差异表达谱;研究hsa_circ_0001017在骨肉瘤细胞中的生物学功能;分析hsa_circ_0001017在骨肉瘤患者组织和外周血清中的表达变化，探讨其临床意义。
　　方法：
　　1)利用第二代高通量测序技术检测3例骨肉瘤组织和1例正常骨组织样本的环状RNA表达谱;挑选其中差异显著且样本间一致性较好的5条环状RNA，在3种骨肉瘤细胞系和6例骨肉瘤患者组织样本中进行qRT-PCR验证，筛选可能作为肿瘤标志物的环状RNA。2）构建筛选出的hsa_circ_0001017过表达和干扰载体，转染人骨肉瘤U20S细胞，MTT法检测转染与细胞的增殖能力，Transwell实验检测迁移和侵袭能力，流式细胞检测凋亡情况。3）入选39例骨肉瘤患者和24例健康志愿者，qRT-PCR检测骨肉瘤组肿瘤组织、瘤旁组织及两组外周血清hsa_circ_0001017的表达变化，ROC曲线分析hsa_circ_0001017对于骨肉瘤的诊断价值，多因素回归分析研究hsa_circ_0001017与肿瘤病理指标的相关性，采用生存曲线和COX回归分析探讨hsa_circ_0001017对骨肉瘤患者生存率的影响。
　　结果：
　　1)3例骨肉瘤组织与正常骨组织间共同差异表达的环状RNA共246个，其中一致上调80个，一致下调166个。6例骨肉瘤组织和3个骨肉瘤细胞系中hsa_circ_0000704、hsa_circ_0001017、hsa_circ_0005035均表达上调，hsa_circ_0001016、hsa_circ_0008934均表达下调，与测序结果一致。2）成功构建了hsa_circ_0001017的过表达和干扰载体并转染U20S细胞。MTT实验显示，hsa_circ_0001017过表达后U2OS细胞的增殖能力显著增加，而hsa_circ_0001017敲低后增殖能力下降。Tanswell实验显示，hsa_circ_0001017过表达后细胞的迁移和侵袭能力显著增加，而hsa_circ_0001017敲低后迁移和侵袭能力下降。流式细胞凋亡检测显示，hsa_circ_0001017过表达后细胞凋亡减少，而hsa_circ_0001017敲低后细胞凋亡增加。3）与健康志愿者相比，骨肉瘤患者外周血清hsa_circ_0001017的表达显著上调。与瘤旁组织相比，骨肉瘤患者肿瘤组织和外周血清hsa_circ_0001017的表达均显著上调且呈线性相关。绘制ROC曲线，外周血清hsa_circ_0001017的AUC为0.8579，肿瘤组织hsa_circ_0001017的AUC为0.8097。按血清hsa_circ_0001017的表达量将骨肉瘤患者分为高表达组和低表达组，多因素回归分析显示hsa_circ_0001017表达上调与骨肉瘤Price分级和肺部转移正性相关;生存分析显示，血清hsa_circ_0001017高表达组的总生存率显著下降，COX回归分析提示血清hsa_circ_0001017表达上调是影响骨肉瘤患者生存期的独立危险因素。
　　结论：
　　1)高通量测序构建的骨肉瘤的环状RNA差异表达谱结果可靠。2)Hsa_circ_0001017在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞中均表达上调，与测序结果一致。3)细胞体外实验发现，hsa_circ_0001017过表达可促进U2OS细胞的增殖、迁移和侵袭，而抑制细胞的凋亡，而hsa_circ_0001017敲低作用相反，提示其在骨肉瘤中发挥了癌基因的作用。4）临床中，骨肉瘤患者的外周血清和组织样本中hsa_circ_0001017的表达一致上调，hsa_circ_0001017表达上调对骨肉瘤有较高的诊断价值，并且hsa_circ_0001017上调越明显，提示骨肉瘤病情越严重，预后越差。