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目的:探讨表观遗传学药物FK228联合5-FU对HeDG2细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:采用对数生长期的人肝癌纽胞株(HepG2细胞株)加入FK228和5-FU单独或联合孵育72h。本实验共分五组:正常对照组(control);FK228 24h组;5-FU 48h处理组;FK228作用24h后换为5-FU 48h联合处理组;FK228和5-FU同时加入组。用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞的增殖能力,观察FK228、5-FU单独或联合作用对HepG2细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率、细胞周期变化,采用RT-PCR法检测p21 mRNA、p16 mRNA及Fas mRNA的表达水平。结果:1.5-FU、FK228对HepG2细胞增殖的影响:5-FU、FK228单独对HepG2分别作用24h、48h和72h,均可抑制人HepG2细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性。2.FK228联合5-FU对HepG2细胞增殖的影响:先用小剂量FK228(4μg/L、8μg/L)处理HepG2细胞24h后联合不同浓度(0.01μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L、10μmol/L)的5-FU再继续培养48h,与相应浓度的5-FU单药组相比,细胞抑制率均明显升高,两药呈现交互效应,提示两药有协同作用。预处理给药方式强于同时给药方式。3.FK228联合5-FU对HepG2细胞周期和凋亡的影响:3.1流式结果显示FK228(4μg/L)单独作用于HepG2细胞后使细胞阻滞于G0/G1期、5-FU(1.0μmol/L)阻滞于S期。将两药联合后HepG2细胞阻滞于G0/G1期比例增加。与FK228、5-FU单独用药组相比,差异具有显著性(p＜0.05)。3.2流式结果显示FK228(4μg/L)和5-FU(1.0μmol/L)单独用药组HepG2细胞的凋亡率分别为(4.05±0.30)%和(5.81±0.32)%;将两药联合作用后凋亡率为(16.9±0.67)%,与单独用药组相比,联合用药组凋亡率明显增高,差异具有统计学意义(p＜0.05)。4.FK228联合5-FU对HepG2细胞p21 mRNA、p 16mRNA及Fas mRNA表达的影响:RT-PCR分析结果显示经过4μg/L FK228预处理24h再联合1.0μmol/L 5-FU作用48h后的联合用药组,HepG2的p21 mRNA、Fas mRNA表达与单独用药组和对照组比较均有明显上调(p＜0.05)。而联合用药组与5-FU单独用药组比较HepG2的p16 mRNA表达无明显上调(p＞0.05)。结论:1.5-FU、FK228对HepG2细胞分别作用24h、48h和72h,均可抑制HepG2肝癌细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性。2.经低浓度FK228预处理与5-FU联合用药可协同抑制HepG2肝癌细胞增殖。3.经低浓度FK228预处理与5-FU联合用药可增强5-FU诱导HepG2肝癌细胞的凋亡比例和细胞周期阻滞于G0/G1期比例。4.经低浓度FK228预处理与5-FU联合用药协同抑制HepG2肝癌细胞增殖的机制主要与p21 mRNA、Fas mRNA表达明显上调有关。