论文部分内容阅读
目的:1.探讨中国2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus;T2DM）患者血浆外泌体lncRNA（lncRNA PRINS,lncRNA DLX6-AS1,lncRNA FAM190A-3,lncRNA ACY1,及lncRNA ARHGAP）与糖尿病视网膜病变（Diabetic retinopathy;DR）间的关联。2.探讨T2DM患者并发DR的相关影响因素。3.进一步探讨血浆外泌体lncRNA对DR发生是否具有潜在诊断价值。方法:1.选择62名T2DM组患者及62名年龄、性别、病程匹配的DR患者,采用统一设计的问卷收集基线资料。2.提取血浆中外泌体,采用蛋白质印迹法、透射电镜观察法及粒径检测验证血浆中的外泌体。提取血浆外泌体中总RNA,最后通过荧光定量PCR测量外泌体中lncRNA PRINS,lncRNA DLX6-AS1,lncRNA FAM190A-3,lncRNA ACY1,和lncRNA ARHGAP的相对表达水平。3.采用t检验比较两组间外泌体lncRNA差异,采用Logistic回归模型进一步分析lncRNA PRINS,lncRNA DLX6-AS1,lncRNA FAM190A-3,lncRNA ACY1,lncRNA ARHGAP相对表达量和DR的关系。4.采用多因素二分类Logistic回归探讨T2DM患者并发DR的相关影响因素。5.采用ROC曲线评估外泌体lncRNA预测DR发病的效果,联合有预测价值的外泌体lncRNA对DR的诊断价值。6.分析不同亚组（性别,年龄,吸烟状况,饮酒状况,脂肪肝史）中外泌体lncRNA和DR发病的关系。结果:1.T2DM组的总胆红素和尿酸均高于DR组（16.20±6.33μmol/l vs.13.40±5.54μmol/l,P=0.029;322.98±90.75 mmol/l vs.283.74±82.86 mmol/l,P=0.040）。空腹血糖和糖化血红蛋白在DR组中均高于T2DM组（10.88±3.23 mmol/l vs.8.26±2.83 mmol/l,P=0.001和9.19±2.20%vs.7.53±1.39%,P＜0.001）。2h胰岛素,空腹C-肽,2h C-肽的水平均在T2DM组中高于DR组（所有P＜0.05）。2.血浆外泌体lncRNA DLX6-AS1的相对表达量在DR组高于T2DM组（1.35±0.74vs.1.04±0.51,P=0.008）。其中男性亚组中两组间lncRNA DLX6-AS1表达量差异有统计学意义（1.53±0.84 vs.1.07±0.59,P=0.007）,在女性亚组两组间lncRNA DLX6-AS1表达量差异无统计学意义（P=0.597）。外泌体lncRNA PRINS和lncRNA FAM190A-3的相对表达量均在T2DM组中高于DR组（1.20±0.25 vs.0.99±0.11,P＜0.001和1.09±0.13 vs.1.04±0.14,P=0.038）。而外泌体lncRNA ACY1和lncRNA ARHGAP在两组间差异无统计学意义。3.外泌体lncRNA PRINS和糖化血红蛋白间存在负相关（r=-0.247,P=0.034）;和2h胰岛素及2h C-肽间均存在正相关（r=0.293,P=0.017和r=0.265,P=0.032）。4.在总人群中lncRNA DLX6-AS1及lncRNA PRINS对DR的诊断均具有预测价值。其中lncRNA DLX6-AS1的灵敏度和特异度分别为0.522和0.783,AUC和95%CI为0.663（0.552-0.774）,P=0.007。Lnc RNA PRINS的灵敏度和特异度的分别为0.745和0.706,AUC和95%CI为0.804（0.722-0.885）,P＜0.001。在男性和女性人群中lncRNA PRINS对DR的诊断均具有预测价值,AUC和95%CI分别为0.778（0.662-0.894）和0.824（0.703-0.946）。而lncRNA DLX6-AS1只在男性人群中具有预测价值,AUC和95%CI为0.700（0.582-0.817）。此外,lncRNA FAM190A-3、lncRNA ACY1以及lncRNA ARHGAP不具有诊断价值。联合lncRNA DLX6-AS1和lncRNA PRINS的AUC和95%CI为0.816（0.743-0.888）,P＜0.001。5.在调整相关混杂因素后,糖化血红蛋白、空腹血糖,及2h C-肽和DR间存在关联,OR和95%CI分别为2.021（1.357-3.011）、1.402（1.139-1.727）和0.588（0.420-0.824）。6.在调整相关混杂因素后,lncRNA DLX6-AS1、lncRNA PRINS以及lncRNA FAM190A-3仍然和DR存在关联,OR和95%CI分别为3.505（1.505-8.163）、0.130（0.051-0.329）、和0.317（0.125-0.802）。7.亚组分析中,性别、年龄、吸烟、饮酒、脂肪肝等变量均和外泌体lncRNA对DR的关联无交互作用。结论:1.男性中外泌体lncRNA DLX6-AS1表达量在DR组高于T2DM组。总人群中外泌体lncRNA PRINS和lncRNA FAM190A-3的表达量均在T2DM组中高于DR组。外泌体lncRNA ACY1以及lncRNA ARHGAP的表达量在两组间差异无统计学意义。2.空腹血糖和糖化血红蛋白是DR的危险因素,2h C-肽是DR的保护因素。3.外泌体lncRNA DLX6-AS1是T2DM患者中并发DR的危险因素,lncRNA PRINS和lncRNA FAM190A-3是T2DM患者中并发DR的保护因素。4.lncRNA DLX6-AS1在男性人群中对DR发病具有较好的诊断价值,总人群中外泌体lncRNA PRINS对DR发病具有诊断价值。5.外泌体在DR发病机制中的作用和外泌体中的lncRNA表达异常相关。