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目的： 运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）从正常大鼠肝组织扩增出HP450基因，以pEGFP-N1质粒为载体，构建pEGFP-HP450真核共表达载体，并通过脂质体介导转染大鼠肝癌细胞株CBRH7919，观察其表达，以获得能够稳定表达HP450基因且具有绿色荧光的大鼠肝癌细胞株CBRH7919，从而为HP450基因对肝癌影响的药理学研究提供实验依据。 方法： 1.真核共表达载体pEGFP-HP450的构建：用Trizol试剂从正常大鼠肝组织中提取总RNA，用RT-PCR技术扩增HP450基因，并克隆到经EcoRI、BamHI双酶切过的puc19载体，经蓝白筛选及PCR、酶切和测序鉴定得到阳性克隆。再用EcoRI、BamHI内切酶将HP450基因从质粒上切取、胶回收纯化后，与 EcoRI、BamHI双酶切过的pEGFP-N1真核表达质粒连接，构建的pEGFP-HP450真核共表达载体经PCR、酶切和测序鉴定。 2. pEGFP-HP450转染大鼠肝癌细胞株CBRH7919：应用脂质体转染技术，用重组质粒pEGFP-HP450转染CBRH7919细胞，24 h后在荧光倒臵显微镜下观察融合基因的表达情况。G418筛选出能稳定表达融合基因的阳性单克隆细胞株，用RT-PCR在mRNA水平检测HP450基因的表达。 结果： 1．通过RT-PCR扩增获得HP450目的基因片段（1477）。 2．成功构建了 puc19-HP450重组载体，HP450基因的测序结果与GenBank公布的一致。 3．成功构建了 pEGFP-HP450真核共表达载体，经 PCR和EcoRI、BamHI双酶切鉴定其目的片段大小与预期的一致。 4．建立了稳定表达 HP450的CBRH7919细胞系，经荧光显微镜观察，转染24 h后细胞内发出绿色荧光；用RT-PCR在mRNA水平检测HP450基因的表达，其大小与预期的一致。 结论： 1.本研究成功构建了HP450真核共表达载体。 2.本研究获得了能稳定表达HP450的CBRH7919细胞。 3.本研究为探讨HP450基因对肝癌影响的药理学研究奠定基础。