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目的:探讨颗粒蛋白前体（progranulin,PGRN）缺陷的肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）来源的外泌体对乳腺癌细胞侵袭和迁移的影响及其相关机制。方法:1.脂肪垫原位注射乳腺癌细胞PY8119,构建野生型（wild type,WT）和PGRN缺陷型(PGRN-deficient,PGRN-/-)C57BL/6小鼠乳腺癌移植瘤模型,观察小鼠肿瘤大小、生存率及肺部转移情况。取小鼠肿瘤组织体外消化处理后,进行流式细胞分析（Flow cytometry,FCM）,比较WT和PGRN-/-小鼠CD11b+F4/80+（外周血来源巨噬细胞标志物）和F4/80+CD206+（M2型巨噬细胞标志物）细胞数量。2.取WT和PGRN-/-小鼠腹腔巨噬细胞,体外诱导为TAMs后,取其培养上清液处理C57BL/6来源的乳腺癌细胞PY8119,通过Transwell实验、划痕实验和蛋白质印迹法检测WT和PGRN-/-TAMs对乳腺癌细胞侵袭、迁移能力和上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）标志物上皮钙黏蛋白（epithelial cadherin,E-cadherin）和神经钙黏蛋白（neuronal cadherin,N-cadherin）表达的影响。3.通过超速离心法提取WT和PGRN-/-TAMs中的外泌体,将其处理乳腺癌细胞PY8119,通过Transwell实验、划痕实验和蛋白质印迹法检测WT和PGRN-/-TAMs来源的外泌体对乳腺癌细胞侵袭、迁移能力和EMT标志物E-cadherin、N-cadherin表达的影响。将人单核细胞白血病细胞（human monocyte leukemia cells,THP-1 cells）诱导为TAMs后,将特异性针对PGRN基因的小干扰RNA（Small interfering RNA,siRNA）转入TAMs中,再提取NC和siPGRN-TAMs的外泌体,将其处理人乳腺癌细胞MCF-7和T47D,检测NC组和siPGRN-TAMs组外泌体对乳腺癌细胞侵袭、迁移能力和EMT标志物的影响。4.取NC和siPGRN-TAMs的外泌体,通过微小RNA（microRNA,miRNA）芯片分析,发现两组差异表达的miRNA为miR-5100,并通过实时荧光定量PCR方法进行验证;将NC和siPGRN-TAMs的外泌体处理人乳腺癌细胞MCF-7和T47D,采用实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌细胞中miR-5100的水平。在人乳腺癌细胞MCF-7和T47D中转染miR-5100的mimic和inhibitor,通过Transwell实验、划痕实验和蛋白质印迹法检测miR-5100对乳腺癌细胞侵袭、迁移能力和EMT标志物E-cadherin、N-cadherin表达的影响。5.预测miR-5100调控的基因,采用实时荧光定量PCR方法、荧光素酶报告基因实验检测miR-5100对CXC趋化因子配体12（chemokine C-X-C motif ligand 12,CXCL12）基因转录的影响。结果:1.乳腺癌原位移植瘤实验结果显示,PGRN-/-小鼠的肿瘤大小、肺部转移灶皆小于WT组,生存率提高。小鼠肿瘤组织的流式细胞分析显示,PGRN-/-小鼠肿瘤中CD11b+F4/80+和F4/80+CD206+细胞数量降低。2.WT和PGRN-/-TAMs的培养上清液处理小鼠乳腺癌细胞PY8119后,Transwell实验、划痕实验和蛋白质印迹法结果显示,与WT组相比,PGRN-/-TAMs引起乳腺癌细胞的侵袭、迁移能力下调,E-cadherin表达上调、N-cadherin表达下调。3.Transwell实验、划痕实验和蛋白质印迹法结果显示,与对照组相比,PGRN-/-TAMs、siPGRN-TAMs来源的外泌体引起乳腺癌细胞的侵袭、迁移能力下调,E-cadherin表达上调、N-cadherin表达下调。4.实时荧光定量PCR结果显示,与NC组相比,siPGRN-TAMs的外泌体中miR-5100上调;将NC和siPGRN-TAMs的外泌体处理人乳腺癌细胞MCF-7和T47D,siPGRN-TAMs外泌体处理组也会引起乳腺癌细胞miR-5100上调。在人乳腺癌细胞MCF-7和T47D中转染miR-5100的mimic和inhibitor,Transwell实验、划痕实验和蛋白质印迹结果显示miR-5100引起乳腺癌细胞的侵袭、迁移能力下调,E-cadherin表达上调、N-cadherin表达下调。5.荧光素酶报告基因实验结果表明,miR-5100可结合CXCL12的3’UTR区域,抑制其转录活性。结论:1.PGRN-/-小鼠乳腺癌移植瘤的生长和转移受到抑制,可能与肿瘤微环境的TAMs数量减少相关;PGRN-/-TAMs通过外泌体抑制乳腺癌细胞的侵袭、迁移和EMT。2.PGRN-/-TAMs外泌体中miR-5100上调,外泌体中的miR-5100通过结合乳腺癌细胞CXCL12的3’UTR区域调控其表达,从而抑制CXCL12/CXCR4轴,最终抑制乳腺癌细胞的侵袭、迁移和EMT。